【摘 要】
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超氧化物歧化酶因其在药物和化妆品等行业体现出重要应用价值,近年来为世人所关注。为了提高该酶的表达量,我们针对E.coli BL21(DE3)/p ET28a(+)-SOD重组表达系统,运用单因素
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(21276280);中国石油大学(华东)自主创新科研计划项目(13CX02062A)
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超氧化物歧化酶因其在药物和化妆品等行业体现出重要应用价值,近年来为世人所关注。为了提高该酶的表达量,我们针对E.coli BL21(DE3)/p ET28a(+)-SOD重组表达系统,运用单因素实验及正交实验相结合的手段,确定了产耐高温Fe-SOD(H171A)重组大肠杆菌的最优培养基成分及最优诱导条件。实验结果表明,重组细菌在当向培养基中加入亮氨酸至终浓度为1.20g/L、氮源为30 g/L酵母粉并且调整碳氮比为1时,达到了最优诱导效果。另外当诱导条件为诱导剂浓度0.15 mmol/L,诱导温度37℃,诱导时间10 h时,重组菌达到了最优诱导效果。在优化条件下,菌体密度达到最高并且目的蛋白表达量为全菌体蛋白的52.90%,比基础培养基发酵条件高出0.68倍。
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