【摘 要】
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目的探讨外源性硫化氢(H2S)减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注时神经元凋亡与PINK1/Parkin通路介导的线粒体自噬的关系。方法健康雄性SD大鼠216只，6～8周龄，体重250～270 g，采用随机数字表法分为4组(n＝54)：对照组(C组)、脑缺血再灌注组(I/R组)、H2S组、H2S+3-甲基腺嘌呤(H2S+3-MA组)。采用大脑中动脉栓塞法制备局灶性脑缺血再灌注损伤模型。H2S+3-MA组于再
【机 构】
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天津市第三中心医院麻醉科 天津市重症疾病体外生命支持重点实验室 天津市人工细胞工程技术研究中心 天津市肝胆疾病研究所 300170,天津市第三中心医院麻醉科 天津市重症疾病体外生命支持重点实验室 天津
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目的探讨外源性硫化氢(H2S)减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注时神经元凋亡与PINK1/Parkin通路介导的线粒体自噬的关系。
方法健康雄性SD大鼠216只，6～8周龄，体重250～270 g，采用随机数字表法分为4组(n＝54)：对照组(C组)、脑缺血再灌注组(I/R组)、H2S组、H2S+3-甲基腺嘌呤(H2S+3-MA组)。采用大脑中动脉栓塞法制备局灶性脑缺血再灌注损伤模型。H2S+3-MA组于再灌注前15 min时腹腔注射3-MA 10 mg/kg，余组腹腔注射等容量生理盐水。H2S组和H2S+3-MA组于再灌注即刻腹腔注射外源性H2S供体0.25% NaSH 10 mg/kg，余组腹腔注射等容量生理盐水。于再灌注1、3和7 d时行神经功能评分和corner实验(计算左侧转身百分比)；取脑组织，确定脑梗死体积百分比、Bax、Bcl-2和caspase-3阳性细胞率、神经元凋亡率，Western blot法检测线粒体微管相关蛋白1轻链3(LC3)、PINK1和Parkin的表达，计算LC3-Ⅱ与LC3-Ⅰ表达的比值(LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ)。
结果与C组比较，I/R组再灌注各时点神经功能评分降低，左侧转身百分比、脑梗死体积百分比、脑组织Bax、Bcl-2和caspase-3阳性细胞率、神经元凋亡率及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ升高，PINK1和Parkin表达上调(P<0.05)；与I/R组比较，H2S组再灌注各时点神经功能评分和Bcl-2阳性细胞率升高，左侧转身百分比、脑梗死体积百分比、脑组织Bax和caspase-3阳性细胞率、神经元凋亡率降低，PINK1和Parkin表达上调，LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ升高(P<0.05)，H2S+3-MA组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)；与H2S组比较，H2S+3-MA组再灌注各时点神经功能评分和Bcl-2阳性细胞率降低，左侧转身百分比、脑梗死体积百分比、脑组织Bax和caspase-3阳性细胞率、神经元凋亡率升高，PINK1和Parkin表达下调，LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ降低(P<0.05)。
结论外源性H2S抑制大鼠局灶性脑缺血再灌注时神经元凋亡的机制与增强PINK1/Parkin通路介导的线粒体自噬有关。
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