【摘 要】
：
目的 Nsp1是新冠病毒的主要毒力因子，介导了病毒在宿主细胞中的免疫逃逸，扩大了病毒感染范围。本研究对Nsp1进行系统生信分析及原核表达，有助于全面理解该蛋白在新冠病毒侵染宿主细胞中的分子机理。方法 采用Pfam、TMHMM、ProtScale、ExPASy和SignalP 4.0等工具对Nsp1的翻译后修饰、理化性质、跨膜螺旋、相互作用网络、同源性及进化特点等进行系统分析；利用分子克隆技术构建重
【基金项目】
：
山西省基础研究计划（自由探索类）项目（No.20210302123397）； 国家级大学生创新创业训练计划项目（No.202117114001）； 山西省高等学校大学生创新创业训练计划重点项目（No.S202117114008）； 山西省高等学校科技创新项目（No.2020L0749）
论文部分内容阅读
目的 Nsp1是新冠病毒的主要毒力因子，介导了病毒在宿主细胞中的免疫逃逸，扩大了病毒感染范围。本研究对Nsp1进行系统生信分析及原核表达，有助于全面理解该蛋白在新冠病毒侵染宿主细胞中的分子机理。方法 采用Pfam、TMHMM、ProtScale、ExPASy和SignalP 4.0等工具对Nsp1的翻译后修饰、理化性质、跨膜螺旋、相互作用网络、同源性及进化特点等进行系统分析；利用分子克隆技术构建重组表达载体pET-22b-Nsp1并进行原核表达。结果 Nsp1由180个氨基酸组成，分子量19.78 kDa,等电点为5.36,不稳定指数28.83,在哺乳动物中的半衰期约30 h,在大肠杆菌内超过10 h,有12个可能的磷酸化位点和3个O-糖基化位点，无信号肽和跨膜螺旋，亲水性较强；二级结构分析显示，Nsp1中无规则卷曲占比最高（45.00%）,其次是α螺旋（25.56%）和延伸链（20.56%）,β-转角占比最低（8.89%）;序列对比和进化分析显示，与SARS-CoV-2 Nsp1序列一致性最高的是蝙蝠非典型冠状病毒WIV1（85.0%）;原核表达发现Nsp1主要在沉淀中表达，经质谱鉴定目的蛋白就是Nsp1。结论 本研究为新冠病毒Nsp1的表达、纯化及功能分析提供了重要借鉴，有助于进一步揭示Nsp1的生物学功能及开展相关抑制剂和抗病毒药物的研发。
其他文献
目的:收集并比较骨科非急性感染性创面患者通过清创换药、壳聚糖-PRP治疗、壳聚糖蜂胶PRP复合材料治疗的各种指标的变化来评价壳聚糖蜂胶PRP复合材料在骨科非急性感染性创面中的临床应用效果和价值。方法:通过收集骨科非急性感染性创面患者60例,并随机依次分为A组（清创换药治疗组）,B组（壳聚糖-PRP治疗组）、C组（壳聚糖蜂胶PRP复合材料治疗组）,干预骨科非急性感染性创面,并通过观察患者治疗7d、1
目的 预测鸟分枝杆菌MAV＿2043基因编码蛋白的结构和功能。方法 利用UniproKB数据库、PredictProtein服务、SWISS-MODEL服务、ProtParam蛋白分析工具、Protcale、TMHMM-2.0服务和SignalP-5.0服务、ProtCompB方法和IEDB数据库等生物信息学预测软件对MAV＿2043编码蛋白的二级和三级结构、理化性质、疏水性分析、信号肽、跨膜区、
目的：借助数据挖掘方法对68篇针灸治疗脾胃虚寒型胃溃疡的临床取穴配伍规律进行分析，研究取穴规律。方法：对近十年CNKI数据库收录的主题为针灸治疗胃溃疡的文献进行检索，确证数据挖掘所得规律与临床诊疗规律的一致性，该文对68篇脾胃虚寒型胃溃疡治疗数据进行分组统计、关联规则算法、聚类分析，研究取穴配伍规律。结果：取穴应用频次最多的穴位分别是中脘、足三里、内关、幽门、胃俞、脾俞、公孙、天枢、关元、肝俞；腧
目的 采用多种生物预测软件分析人前列腺相关基因4（prostate-associated gene 4,PAGE4）的结构、功能。方法用ProtParam在线工具分析PAGE4的理化性质，利用NetPhos 3.1 Server、NetOGlyc 4.0 Server、NetNGlyc 1.0 Server与cBioPortal数据库预测PAGE4的磷酸化、糖基化及突变位点。通过TMHMM Ser
＜正＞《课程标准（2011年版）》指出:“有效的教学活动是学生学和教师教的统一,学生是学习的主体,教师是学习的组织者、引导者和合作者。”但在实际教学中,有些教师在不知不觉中就会“包办”课堂,不能留给学生充足的思考空间,导致学生的课堂学习效果大打折扣。