【摘 要】
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目的探讨基质金属蛋白酶（MMP）-9调控CD73自视网膜色素上皮（RPE）细胞膜表面脱落的机制。方法以脂多糖及肿瘤坏死因子-α共同干预体外培养的人RPE细胞，诱导RPE细胞膜表面CD73脱落。同时给予磷脂酶C （PLC）抑制剂ET-18-OCH3 30.0 μmol/L或广谱MMP抑制剂ONO-4817 5.0 μmol/L进行干预；流式细胞仪检测RPE细胞膜表面CD73含量变化。以选择性MMP-
【机 构】
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300052 天津医科大学附属总医院检验科,300211 天津医科大学第二附属医院检验科,300211 天津医科大学第二附属医院眼科
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目的探讨基质金属蛋白酶（MMP）-9调控CD73自视网膜色素上皮（RPE）细胞膜表面脱落的机制。
方法以脂多糖及肿瘤坏死因子-α共同干预体外培养的人RPE细胞，诱导RPE细胞膜表面CD73脱落。同时给予磷脂酶C （PLC）抑制剂ET-18-OCH3 30.0 μmol/L或广谱MMP抑制剂ONO-4817 5.0 μmol/L进行干预；流式细胞仪检测RPE细胞膜表面CD73含量变化。以选择性MMP-2、MMP-9抑制剂或相应siRNA进行干预；利用基因定点突变技术改造CD73中潜在的MMP-9识别位点，在CD73-/- RPE细胞中过表达野生型（Wt）及突变型（Mut）CD73，检测Wt、Mut-CD73脱落情况。
结果广谱MMP抑制剂可有效抑制CD73自RPE细胞膜表面脱落；PLC抑制剂不能抑制CD73自RPE细胞膜表面脱落。选择性抑制MMP-9活性或以siRNA下调MMP-9的表达也均可抑制CD73自RPE细胞膜表面脱落。表达于CD73-/-RPE细胞膜表面的Wt-CD73可发生脱落，而Lys547-Phe548编码位点突变的CD73未见脱落。
结论MMP-9通过水解Lys547-Phe548位点而参与炎症状态下CD73自RPE细胞膜表面的脱落。
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