烯酯酰辅酶A水解酶1过表达对小鼠低淋巴道转移潜能肝癌细胞株Hca-P生物学行为的影响

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目的 探讨烯酯酰辅酶A水解酶1(Ech1)过表达对小鼠低淋巴道转移潜能肝癌细胞株Hca-P体外增殖生长、迁移和侵袭能力的影响,及其Ech1表达水平与肝癌淋巴道转移潜能的关系.方法 将pcDNA3.1(+)-Ech1重组质粒和空载体pcDNA3.1(+)分别稳定转染Hca-P细胞,通过半定量逆转录聚合酶链反应和酶联免疫吸附试验检测目的基因及其蛋白表达水平;在获得过表达Ech1的PEch1细胞株和实验对照组P空载体细胞株后,采用CCK-8法检测细胞分裂增殖能力,Transwell迁移实验和Transwell侵袭实验评估Ech1过表达对Hca-P细胞迁移和侵袭能力的影响.结果 PEch1组和P空载体组细胞中Ech1 mRNA相对表达水平分别为3.21±0.43和1.44±0.03,差异有统计学意义(P=0.029).PEch1组、P空载体组和未经处理的Hca-P组(P组)细胞中Ech1蛋白表达水平分别为0.140±0.005、0.088±0.003和0.078 ±0.006,差异有统计学意义(P<0.05).PEch1组的细胞增殖能力明显高于P空载体组和P组(P<0.05).Transwell迁移实验显示,PEch1组、P空载体组和P组穿膜细胞数分别为(143.00±7.25)个、(95.73±3.88)个和(106.67±3.54)个,PEch1组与P空载体组和P组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05).Transwell侵袭实验显示,PEch1组、P空载体组和P组穿膜细胞数分别为(77.20±5.46)个、(46.34±4.35)个和(49.80±5.21)个,PEch1组与P空载体组和P组比较,差异均有统计学意义(均P <0.05).结论 Ech1过表达可以显著促进Hca-P细胞增殖,增强其迁移和侵袭能力.Ech1有望成为临床基因治疗肝癌的靶点之一.

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