乙型肝炎病毒DNA荧光定量PCR的建立与应用

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目的建立血浆(血清)HBVDNA荧光定量PCR检测方法,探讨其临床应用价值。方法用Pucm—T载体和PCR纯化产物连接,转染DH5x茵,筛选阳性茵落,提取质粒,制作外标准品;在HBV基因组S区设计一对引物和TaqMan探针.严格优反应物的组成和扩增条件,并对该方法进行评价。结果建立的HBVDNA荧光定量PCR最低可检出800拷贝/ml;批内误差为1.8%-6.5%,批间误差2.6-9.1%;在~拷贝/ml之间与Ct值具有很好的线性(Ct=-1.39111n(x)+41.65,y=-0.9958);外周血H
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