人高活性粒细胞集落剌激因子cDNA克隆与鉴定

来源 :中华血液学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xunitt1
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作者以大肠杆菌脂多糖(LPS)刺激的人外周血单核细胞总RNA为原始材料,从总RNA纯化mRNA,再反转录合成cDNA第一链,利用化学合成的一对特异引物进行多聚酶链反应(PCR)体外基因扩增,克隆出去信号肽序列与3'端非翻译区的粒细胞集落刺激因子(G-CSF)cDNA片段(544bp),以特异探针进行Southern blot杂交表明为高活性cDNA,PCR产物重组入ρBV220后,经双链模板直接测序分析进一步表明克隆基因为高活性cDNA,其基因序列与国外文献报道一致。

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