嗜酸乳杆菌S-层蛋白表面展示系统的构建及酶切位点分析

来源 :安徽农业科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zpbaqq1314

【摘要】

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[目的]克隆和表达嗜酸乳杆菌S-层蛋白基因,用其构建能承载外源抗原表位的乳酸菌细胞表面展示系统。[方法]以染色体DNA为模板克隆S-层蛋白基因SlpA,通过酶切、连接将其插入大

【作者】

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刘琼王春凤杨桂连秦守涛刘曼

【机构】

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吉林工程技术师范学院食品工程学院,吉林农业大学动物科学技术学院

【出处】

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安徽农业科学

【发表日期】

：

2011年30期

【关键词】

：

嗜酸乳杆菌 S-层蛋白表面展示系统 L.acidophilus S-layer protein Surface display

【基金项目】

：

国家“863”计划项目（2007AA10Z322,2006AA10A205）, 国家自然科学基金项目（30671573,30700602,30870116）, 吉林省科技发展计划项目（20080104）

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[目的]克隆和表达嗜酸乳杆菌S-层蛋白基因,用其构建能承载外源抗原表位的乳酸菌细胞表面展示系统。[方法]以染色体DNA为模板克隆S-层蛋白基因SlpA,通过酶切、连接将其插入大肠杆菌-乳酸菌穿梭表达载体pW425et,构建表面展示系统pW425et-S,并对酶切位点进行分析。[结果]将pW425et-S转化入thyA基因缺陷型E.coli X13感受态细胞,SDS-PAGE、Western-blotting、全细胞ELISA检测表明,在重组菌表面表达出S-层蛋白,构建出表面展示系统,确定BstEⅡ作为融合

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