大鼠心脏骤停心肺复苏后脑Occludin蛋白表达及其对血脑屏障的影响

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目的 探讨大鼠心脏骤停心肺复苏后脑Occludin蛋白表达及其对血脑屏障的影响.方法 将200只Sprague-Dawley雄性大鼠根据随机数字表法分为对照组和复苏组,各100只.对照组未进行窒息及心肺复苏,仅进行麻醉和动静脉及气管插管;复苏组制作心脏骤停模型,常规心肺复苏.对照组50只大鼠术后稳定10 rin后和复苏组50只大鼠自主呼吸恢复(ROSC)后于2、6、12、24、48 h(每个时点10只)断头处死取脑组织,采用免疫组织化学染色方法检测脑组织Occludin蛋白的表达;对照组余50只大鼠术后稳定10 min后和复苏组余50只大鼠ROSC后于0、4、10、22、46 h(每个时点10只)经大鼠尾静脉按3 mg/kg标准注射20 g/L伊文氏蓝,在相应时点2h后断头处死取脑组织,用荧光分光光度计计算血脑屏障对伊文氏蓝的通透性.结果 对照组术后各时点Occludin蛋白表达阳性细胞数和伊文氏蓝含量差异均无统计学意义(均P>0.05).复苏组在ROSC后2、6、12、24、48 h Occludin蛋白表达阳性细胞数先降低后升高,各时点均明显低于对照组[(68.2±1.0)个/高倍视野比(86.8±1.3)个/高倍视野、(42.1±1.6)个/高倍视野比(85.1±2.7)个/高倍视野、(18.1 ±1.1)个/高倍视野比(84.9±2.8)个/高倍视野、(37.8±0.7)个/高倍视野比(82.1 ±3.1)个/高倍视野、(61.2±1.0)个/高倍视野比(83.8±2.5)个/高倍视野],伊文氏蓝含量先升高后降低,各时点均明显高于对照组[(0.496±0.042) μg/g比(0.245±0.012) μg/g、(0.704±0.021) μg/g比(0.236 ±0.016) μg/g、(0.898±0.047) μg/g比(0.239±0.011)μg/g、(0.874±0.035)μg/g比(0.251±0.019) μg/g、(0.692±0.036)μg/g比(0.232±0.043)μg/g],差异均有统计学意义(均P<0.05).复苏组大鼠脑Occludin蛋白表达阳性细胞数与伊文氏蓝含量呈负相关(r=-0.862,P<0.01).结论 大鼠心脏骤停心肺复苏后脑Occludin蛋白表达降低,紧密连接结构受损,导致血脑屏障通透性增加.
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