目的:探讨通过无血清悬浮培养的方法培养卵巢癌HEY细胞株,富集悬浮细胞球并检测悬浮细胞中乙醛脱氢酶1(ALDH1)表达的情况,评价ALDH1是否可作为卵巢癌干细胞的标志物。方法:1用含有生长因子的无血清培养基对卵巢癌HEY细胞株进行悬浮培养获得细胞球,与贴壁生长的细胞进行比较。2通过流式细胞检测技术筛选出ALDH1阳性(ALDH1~+)及ALDH1阴性(ALDH1~-)细胞,通过软琼脂克隆形成实验、裸鼠移植瘤实验检测两组细胞的自我复制、增殖、克隆形成及侵袭能力。3通过3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)方法检测两组细胞经卡铂药物处理后体外增殖能力。4Western blotting检测两组细胞中的β-连环素(β-catenin)的表达情况。结果:1悬浮细胞中ALDH1~+细胞比例明显高于贴壁细胞(P<0.05)。2显微镜下观察,ALDH1~+细胞球克隆形成率高于ALDH1~-(P<0.05);ALDH1~+裸鼠瘤体积大于ALDH1~-移植瘤(P<0.05)。3经卡铂药物处理后,ALDH1~+细胞球从第4天开始增殖情况明显高于ALDH1~-组(P<0.05)。4Western blotting检测示,ALDH1~+中β-catenin的表达明显高于ALDH1~-(P<0.05)。结论:用含有生长因子的无血清培养基培养卵巢癌HEY细胞株能够形成卵巢癌干细胞球并高表达ALDH1,ALDH1~+细胞恶性程度更高,化疗耐药性能更强,ALDH1可作为一种卵巢癌干细胞标志物。