【摘 要】
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目的 探讨5-氨基咪唑-4-羟酰胺核糖核酸甲酰基转移酶(A T IC)在乳腺癌中的表达情况及其对乳腺癌细胞系MB231生物学功能的影响.方法 运用实时荧光定量PCR法(qPCR法)和蛋白印迹法(Western blot法)检测ATIC在9例乳腺癌患者癌组织以及癌旁组织中的表达情况;通过慢病毒干扰技术构建A T IC低表达的乳腺癌细胞系M B231并通过qPCR法和Western blot法检测ATIC的干扰效果;采用CCK-8法、平板克隆实验和EDU染色法联合检测细胞增殖情况;采用Transwell实验和
【机 构】
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江苏大学附属医院 中心实验室,镇江 212001;江苏大学附属医院 检验科,镇江 212001;江苏大学附属医院 肿瘤科,镇江 212001
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目的 探讨5-氨基咪唑-4-羟酰胺核糖核酸甲酰基转移酶(A T IC)在乳腺癌中的表达情况及其对乳腺癌细胞系MB231生物学功能的影响.方法 运用实时荧光定量PCR法(qPCR法)和蛋白印迹法(Western blot法)检测ATIC在9例乳腺癌患者癌组织以及癌旁组织中的表达情况;通过慢病毒干扰技术构建A T IC低表达的乳腺癌细胞系M B231并通过qPCR法和Western blot法检测ATIC的干扰效果;采用CCK-8法、平板克隆实验和EDU染色法联合检测细胞增殖情况;采用Transwell实验和划痕实验测定细胞迁移能力;Western blot法检测ATIC对上皮间质转化关键蛋白(E-cadherin和Vimentin)以及增殖相关蛋白PCNA表达的影响.结果 ATIC在乳腺癌组织中的表达明显高于癌旁组织;ATIC在MB231细胞和T47D细胞中表达较高;sh-ATIC-MB231细胞系构建成功,sh-ATIC组ATIC的蛋白和mRNA水平均明显低于sh-NC组;敲低ATIC表达明显减弱乳腺癌细胞MB231的增殖和迁移能力;ATIC下调导致E-cadherin表达水平上调而Vimentin、PCNA相对表达水平下调.结论 ATIC可以影响乳腺癌细胞的增殖和迁移,减缓乳腺癌的发展,有望成为乳腺癌治疗的新靶点.
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