【摘 要】
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目的:探讨大蒜素诱导THP-1细胞凋亡中P38MAPK及Fas基因表达的变化。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度大蒜素对THP-1细胞增殖抑制率;Annexin V-FITC/PI双染法流式
【机 构】
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重庆医科大学附属第一医院血液内科,重庆医科大学基础医学院病理生理教研室,
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目的:探讨大蒜素诱导THP-1细胞凋亡中P38MAPK及Fas基因表达的变化。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度大蒜素对THP-1细胞增殖抑制率;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术(FCM)检测凋亡率的变化;免疫细胞化学法观察大蒜素处理后细胞内磷酸化P38MAPK(P-p38MAPK)表达及分布变化;Western blot检测大蒜素处理前后细胞内P-p38MAPK和Fas蛋白表达量的变化。结果:MTT显示大蒜素能抑制THP-1细胞增殖,并呈时间-剂量依赖性。其72h中效浓度(IC50)为12.8 mg.L-1。Annexin V-FITC/PI检测凋亡率随大蒜素浓度增加而增加。免疫细胞化学法检测药物处理后P-p38MAPK表达增加,主要分布于细胞核与细胞浆,而阴性对照组仅弱表达。Western blot结果分析P-p38MAPK,Fas蛋白表达量随大蒜素浓度的增加而增加,呈剂量依赖性。其阴性组、72 h的1/2 IC50组、IC50组P-p38MAPK蛋白表达水平(相对灰度值)分别为0.2598±0.0132,0.3612±0.008 3,0.5056±0.0055;Fas蛋白表达水平分别为0.287 4±0.0089,0.426 8±0.0079和0.597 1±0.0109,差别均有显著性意义(P<0.01)。结论:大蒜素可诱导THP-1细胞凋亡,其诱导凋亡机制可能是通过激活P-p38MAPK/Fas途径实现。
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