【摘 要】
：
目的本研究旨在探讨长链非编码RNA母系表达基因3（LncRNA MEG3）过表达对胰腺癌细胞（PANC1）自噬、凋亡及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）通路的影响。方法构建pCMV-N-Flag-MEG3表达质粒并转染入PANC1细胞。实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）法检测HPDE6C7（正常胰腺细胞）组、PANC1（空白对照）组、Vector（PANC1细胞转染空载体）组和MEG3（
【机 构】
：
杭州市余杭区第一人民医院（浙江大学医学院附属第二医院余杭院区）检验科 311100,杭州市余杭区第一人民医院（浙江大学医学院附属第二医院余杭院区）胸外科 311100,杭州市余杭区第一人民医院（浙江大
论文部分内容阅读
目的本研究旨在探讨长链非编码RNA母系表达基因3（LncRNA MEG3）过表达对胰腺癌细胞（PANC1）自噬、凋亡及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）通路的影响。
方法构建pCMV-N-Flag-MEG3表达质粒并转染入PANC1细胞。实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）法检测HPDE6C7（正常胰腺细胞）组、PANC1（空白对照）组、Vector（PANC1细胞转染空载体）组和MEG3（PANC1细胞转染pCMV-N-Flag-MEG3重组质粒）组中LncRNA MEG3表达量；四甲基偶氮唑蓝比色（MTT）法、流式细胞术和单丹磺酰尸胺（MDC）染色法分别检测LncRNA MEG3过表达对胰腺癌细胞PANC1增殖、凋亡和自噬的影响；蛋白免疫印迹（Western blot）法检测LncRNA MEG3过表达对胰腺癌细胞PANC1中抑凋亡因子（Bcl-2）、促凋亡因子（Bax）和自噬因子（Beclin 1）蛋白表达水平及mTOR通路中mTOR、核糖体p70S6激酶蛋白（SK61）和核起始因子4E结合蛋白1（4E-BP1）磷酸化水平的影响。
结果与PANC1组和Vector组相比，MEG3组LncRNA MEG3表达水平（0.36±0.08 vs 0.35±0.11 vs 0.69±0.09）、胰腺癌细胞PANC1增殖抑制率（3.35%±0.12% vs 3.23%±0.09% vs 36.77%±0.13%）、自噬率（29.32%±1.03% vs 26.73%±1.32% vs 57.76%±1.09%）、凋亡率（9.85%±1.58% vs 9.73%±1.12% vs 35.89%±1.05%）、Bax（0.26±0.08 vs 0.29±0.05 vs 0.83±0.08）和Beclin 1（0.15±0.06 vs 0.17±0.02 vs 0.61±0.03）表达水平显著升高（均P < 0.05），Bcl-2表达水平（0.79±0.12 vs 0.81±0.09 vs 0.30±0.03）及mTOR通路中mTOR（1.08±0.05 vs 1.06±0.08 vs 0.37±0.10）、SK61（1.12±0.06 vs 1.11±0.09 vs 0.41±0.03）和4E-BP1（0.97±0.07 vs 0.95±0.03 vs 0.39±0.05）磷酸化水平显著降低（均P<0.05）。
结论LncRNA MEG3过表达能抑制胰腺癌细胞PANC1增殖促进细胞凋亡，促进细胞自噬囊泡的形成，可能与阻滞mTOR通路有关。
其他文献
目的探讨术前右美托咪定滴鼻对咽喉部手术鼾症儿童术后躁动及血流动力学的影响。方法选择2019年1月至2019年9月于新乡医学院第一附属医院行咽喉部手术的62例鼾症儿童为研究对象,采用随机数字表法将患儿分为观察组和对照组,每组31例。麻醉诱导前30 min,观察组患儿给予1μg·kg-1右美托咪定(8μg·mL-1)滴鼻,对照组患儿给予等量生理盐水滴鼻。拔管后10 min,采用脸谱法评估患儿疼痛程度,小儿麻醉苏醒期躁动量化评分表评估患儿躁动情况;比较2组患儿麻醉开始
泛素化是一种作用范围广泛的蛋白质翻译后修饰,参与心肌梗死等疾病的发生和发展。近期的研究表明,泛素化对缺血再灌注引起的心肌细胞损伤有保护作用,同时还可参与心肌细胞的内源性再生过程,因此可能为心肌梗死的治疗提供新的方向。现综述泛素化的保护作用的机制,论述在此过程中涉及的因子和作用机制。
目的探讨心肌造影超声心动图(MCE)联合多巴酚丁胺负荷超声心动图(DSE)定量评价动脉粥样硬化性心脏病即冠心病患者心肌血流灌注的临床价值,及不同程度狭窄冠状动脉供血心肌的微循环变化特点。方法32例临床确诊的冠心病患者进行MCE联合DSE即心肌造影多巴酚丁负荷超声心动图(MCE-DSE)检查,根据冠状动脉造影结果将不同程度狭窄冠状动脉供血心肌按超声心动图16节段法进行分组:A组(狭窄率<50%,n=152),B组(狭窄率50%~69%,n=124),C组(狭窄率70%~89%,n=116),D组(狭窄
目的探讨机械按压对急诊科非创伤心搏骤停患者自主循环恢复(ROSC)及预后的影响因素。方法回顾性分析2018年6月1日—2019年12月31日在急诊抢救室使用机械按压治疗的急性非创伤性心搏骤停患者的临床资料,根据心搏骤停患者心肺复苏(CPR)后是否发生ROSC,分为ROSC组和非ROSC组,采用多因素logistic回归分析影响心搏骤停患者机械按压后ROSC及预后的影响因素。结果单因素分析显示CPR持续时间≤30 min,肾上腺素用量≤5 mg,早期使用Lucas心肺复苏仪(≤4 min),入抢救室时pH&
室间隔缺损在儿童中是常见的先天性心脏病之一,若不及时闭合可合并主动脉瓣脱垂,根据右冠瓣脱垂程度可分为轻、中、重三种程度。室间隔缺损合并主动脉瓣脱垂治疗上包括经皮介入封堵、外科手术修补和经胸小切口微创封堵。经皮介入封堵是最常用的治疗方式,重度脱垂不满足介入封堵指征的室间隔缺损患者可选择外科手术修补,经胸小切口微创封堵是近年来的新技术,治疗效果及其并发症仍需进一步验证。现就室间隔缺损合并主动脉瓣脱垂的诊断与治疗进行综述。
心血管疾病是一种严重威胁人类健康的常见病,具有高患病率和高死亡率的特点,全世界每年死于心血管疾病的人数居各种死因首位。免疫调控等因素与心血管疾病的发生和发展密切相关。Toll样受体(TLRs)是一类模式识别受体,主要表达于细胞膜上,且与微生物识别有关。TLRs能识别特定类型微生物相对保守的分子成分,即病原体相关分子模式,通过激活细胞信号传导途径介导天然免疫反应,还可诱导免疫细胞产生细胞因子,帮助机体建立获得性免疫。近年来研究发现TLRs在心血管疾病中发挥重要作用,现对TLRs与临床心血管疾病的关系进行综述
目的:探讨n 99Tcn m-MIBI SPECT双时相显像联合术中甲状旁腺激素（parathyroid hormone，PTH）快检对甲状腺癌合并疑似甲状旁腺肿物的诊断效能。n 方法:回顾性分析郑
目的探讨外周血环状RNA(circRNA)DLGAP4表达水平与类风湿关节炎(RA)合并心力衰竭(HF)的关系。方法选取陕西省核工业二一五医院2017年8月—2019年8月收治的RA患者42例为研究对象,根据是否合并HF分为RA组(n=28)和RA+HF组(n=14),并选取同期进行体检的健康人30例为对照组。酶联免疫吸附试验检测外周血中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)水平,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)技术检测外周血中circDLGAP4和miR-143的表达水平,Sp
目的 探讨盐酸多奈哌齐对骨关节炎大鼠软骨组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和带有血小板凝血酶敏感蛋白样模体的解整链蛋白金属蛋白酶-5(ADAMTS-5)表达的影响.方法 将30只无特
目的探讨复方甘草酸苷胶囊治疗系统性红斑狼疮的疗效及对患者免疫应激反应的调节作用。方法选择2018年6月—2020年3月在丹东市第一医院就诊的120例活动期系统性红斑狼疮患者,按照随机数字表法将患者分为2组各60例。对照组采用醋酸泼尼松片治疗,研究组采用醋酸泼尼松片联合复方甘草酸苷胶囊治疗,2组均治疗6个月。观察2组治疗前后系统性红斑狼疮疾病活动指数(SLEDAI)、血沉、血清C反应蛋白(CRP)及免疫应激指标[血清中白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)、单核细胞趋化蛋白4(MCP