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目的:构建过表达西藏小型猪GHR基因显负性突变体的慢病毒载体,并对其进行功能验证。方法:首先以pRLG3A为模板,PCR扩增CAG启动子,In-Fusion克隆至Cla I/BamH I双酶切的pCD550A-1载体中,替换其EF1α启动子,获得pCAGGP;然后从西藏小型猪肝脏组织cDNA中PCR扩增GHR基因的显负性突变体片段(dnGHR);最后将dnGHR片段插入pCAGGP多克隆位点,最终得到过表达猪GHR显负性突变体的慢病毒载体pCdnGGP。对所构建的质粒进行测序和酶切鉴定。将所构建的pCdn