【摘 要】
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目的:克隆大鼠白细胞介素10(IL-10)cDNA的全长序列,并使其在大肠杆菌中表达,为其分子生物学利用奠定基础.方法:无菌条件下切取大鼠的脾脏,收获脾细胞,用LPS刺激培养4 h;提取
【机 构】
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徐州医学院附属医院泌尿外科,天津泌尿外科研究所
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目的:克隆大鼠白细胞介素10(IL-10)cDNA的全长序列,并使其在大肠杆菌中表达,为其分子生物学利用奠定基础.方法:无菌条件下切取大鼠的脾脏,收获脾细胞,用LPS刺激培养4 h;提取细胞的总RNA,用RT-PCR技术克隆IL-10cDNA的全长序列;经测序后将IL-10cDNA插入表达载体pJW2,转染DH5α细胞后进行热诱导表达并对表达蛋白进行测定.结果:脾细胞经LPS刺激后IL-10转录水平增加,从提取的RNA易反转录并扩增出期望的PCR产物,测序结果表明得到的IL-10cDNA序列与基因库报告的
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