人c-myc反义真核表达载体的构建及其对BT325细胞c-Myc蛋白表达的抑制作用

来源 :第四军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bluefireyang
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的: 构建人c-myc第三外显子及3非翻译区反义真核表达载体,用脂质体介导法转染入胶质瘤BT325细胞,以期降低其c-Myc表达水平. 方法: 采用基因重组方法构建真核表达载体;用G418筛选抗性细胞克隆;用免疫细胞化学ABC法检测细胞蛋白质的表达;用MTT法测定顺铂作用下,未转染及转染组细胞的存活率. 结果: c-myc反义真核表达载体在BT325细胞中稳定表达,转染细胞c-Myc表达水平显著降低;c-Myc表达减弱细胞对顺铂诱导凋亡的敏感性. 结论: 抑制c-myc DNA第三外显子及其3端非翻译区反义表达载体能够显著抑制c-myc基因的表达;c-Myc在化疗药物诱导肿瘤细胞凋亡的过程中有重要作用.
其他文献
用60%吡虫啉FS单剂及混合40%萎锈.福美双SC进行花生拌种,调查各处理对花生常见病虫害的防控效果以及对花生安全性和产量的影响。结果表明,药剂拌种对花生的生长无不良影响,对
目的:建立一个在大鼠心肌细胞表达人白细胞介素10(HumanInterleukin10,hIL10)的重组逆转录病毒载体基因转移系统,为下一步的研究工作做准备。方法:将构建的表达人白细胞介素10的逆转录病毒重组体pLX(hIL10)SN经PA317细胞包装
目的: 重组表达angiostatin的功能结构域K1-3,并制备抗体,为其作用机理研究打下基础. 方法: 设计引物,通过PCR以人纤溶酶原cDNA为模板扩增出K1-3基因片段,克隆至pGEX-4T-1融
目的:建立表达具有生物活性的人 I L12 的杆状病毒/昆虫细胞表达系统。方法:将p40 和p35 c D N A 一起构建入杆状病毒转移载体p Ac U W42,然后与杆状病毒 Ac U W 1.lac Z D N A 共同转染昆虫细胞 Sf9,使两者产生同源重
目的:制备睫状神经营养因子(ciliary neurotrophic factor,CNTF)单克隆抗体.方法:将CNTF免疫的BALB/c小鼠脾细胞和SP2/0骨髓瘤细胞融合,经3次克隆化培养,获得分泌CNTF单克隆
目的:观察缺血再灌注肠道组织原癌基因bcl2表达的特征、规律以及与肠道细胞凋亡发生的关系。方法:将16只Wistar大鼠分成正常对照、肠系膜上动脉夹闭缺血45分钟、肠系膜上动脉夹闭45分钟与再灌注
目的:探讨烧伤合并内毒素血症早期肝脏损害的发生机制。方法:大鼠20%Ⅲ度体表烧伤合并腹腔注入内毒素(LPS)复制急性肝损害模型,随机分为烧伤复合内毒素注射组(烧注组)、单纯烧伤组(单烧组)、
目的:建立体外大量扩增树突状细胞( D C)的方法,并对 D C进行形态学和免疫学性质鉴定。方法:制备小鼠骨髓细胞,用免疫磁珠方法去除其中的淋巴细胞、单核巨噬细胞及粒细胞,将阴性选择到的
目的:检测血管内皮细胞蛋白酪氨酸磷酸化水平对内皮屏障功能的影响。方法:利用荧光比率测定技术测定猪游离冠状微静脉的通透性。利用Western印迹法和重组抗磷酸酪氨酸多克隆抗体测定内
目的:观察神经酰胺对HL-60细胞凋亡产生的影响、凋亡相关基因bcl2变化及与蛋白激酶C(CPK)途径的关系,探讨其在细胞凋亡过程中可能的调节作用.方法:采用DNA凝胶电泳、细胞荧光