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目的建立一种能特异检测我国致病性钩端螺旋体所有血清型的PCR方法.方法从Genbank中选取钩体23S rDNA序列,设计一对种特异性引物.通过Blast验证引物的特异性和广谱性后,用PCR检测我国流行的所有18个血清群钩体代表株,观察其敏感性和特异性.探讨简便的样品处理方法,并对模拟标本进行检测.结果18个血清群的25株钩体均出现单一482 bp的特异性扩增产物,而双曲钩体及其他螺旋体、微生物、空白对照均无任何DNA扩增条带.PCR单一反应最小检出钩体数为8条.用煮沸法、试剂盒、SiO高盐吸附法及氯仿苯