【摘 要】
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根据NCBI上公布的序列设计引物,从Hep G2细胞系中克隆了FXRα的开放阅读框（ORF）,构建原核表达载体p ET-28a-FXRα,转化E.coli BL21（DE3）,经1.0 mmol·L^-1IPTG诱导表达,SDS-P
【机 构】
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河南农业大学生命科学学院,河南省商业科学研究所有限责任公司
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（31201332）, 河南省科技攻关重点项目（132102310033）
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根据NCBI上公布的序列设计引物,从Hep G2细胞系中克隆了FXRα的开放阅读框（ORF）,构建原核表达载体p ET-28a-FXRα,转化E.coli BL21（DE3）,经1.0 mmol·L^-1IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测,成功诱导FXRα蛋白;以镍柱亲和层析纯化获得FXRα蛋白,免疫家兔,制备多克隆抗体。Western Blot分析表明：制备的多克隆抗体能够特异识别重组蛋白,为深入研究此受体的功能及新药发现奠定了基础。
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