胡萝卜抗冻蛋白基因的克隆及其在E.coli中的表达

来源 :中山大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：cxr1682000

【摘要】

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对中国的一个胡萝卜品种进行了冷诱导前后幼苗总蛋白组成的比较、分析,SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的结果表明两者在相对分子质量36 000附近有一条蛋白带的差别.由此推测实验的胡

【作者】

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范云刘兵王宏斌王树启王金发

【机构】

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中山大学基因工程教育部重点实验室∥生命科学学院

【出处】

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中山大学学报：自然科学版

【发表日期】

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2002年3期

【关键词】

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胡萝卜冷诱导抗冻蛋白基因 AFP基因基因克隆基因表达大肠杆菌植物抗寒性 carrot cold_induce antifreeze protein

【基金项目】

：

广东省自然科学基金

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对中国的一个胡萝卜品种进行了冷诱导前后幼苗总蛋白组成的比较、分析,SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的结果表明两者在相对分子质量36 000附近有一条蛋白带的差别.由此推测实验的胡萝卜品种在冷诱导过程中有抗冻蛋白(AFP)表达.根据相关的研究结果设计引物,以胡萝卜幼苗基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到了长1 099 bp的抗冻蛋白基因.测序结果表明其与GenBank公布的afp序列仅有3个碱基的差别.将此抗冻蛋白基因克隆进大肠杆菌表达载体pGEX4T1,在IPTG的诱导下表达出了含有AFP的约60 000的融合

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