论文部分内容阅读
目的
利用毕赤酵母系统表达一种基于蛇毒蛋白triflin的致病相关蛋白1(PR-1)功能区蛋白TFPR1。
方法从质粒pUC57-TFPR1中PCR扩增目的基因，插入毕赤酵母表达载体pPICZαA，构建重组表达质粒pPICZαA-TFPR1，转染入巴斯德毕赤酵母野生型X33菌株，经甲醇诱导表达重组蛋白TFPR1，采用ELISA法筛选阳性菌株后，SDS-PAGE及Western blot对表达产物进行鉴定。
结果重组表达质粒pPICZαA-TFPR1经双酶切和测序鉴定证明构建正确；重组蛋白以分泌形式表达，相对分子质量约16×103。
结论利用巴斯德毕赤酵母表达系统成功表达TFPR1蛋白，为进一步研究其功能和作为佐剂的应用提供参考资料。