【摘 要】
：
目的 观察人端粒酶催化亚单位(hTERT)基因对SW480细胞生物学特性的影响.方法 将重组质粒pGPU6/GFP/Neo-hTERT-shRNA (hTERT-shRNA)用脂质体转染法导人大肠癌细胞株SW480,实
论文部分内容阅读
目的 观察人端粒酶催化亚单位(hTERT)基因对SW480细胞生物学特性的影响.方法 将重组质粒pGPU6/GFP/Neo-hTERT-shRNA (hTERT-shRNA)用脂质体转染法导人大肠癌细胞株SW480,实验分4组,每组设3个复孔,分别于转染后24、48、72 h,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测hTERT mRNA的表达,免疫细胞化学法检测hTERT蛋白表达,PCR-TRAP-ELISA法检测端粒酶活性,流式细胞仪检测细胞周期分布,终端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法和透射电镜观察细胞凋亡变化及共聚焦显微镜观察线粒体膜电位(MMP)的改变.结果 转染后48 h hTERT-shRNA组hTERT mRNA相对表达量为0.32±0.03,hTERT蛋白表达的平均灰度值为209.60±17.10,端粒酶A450 ～ A630值为2.242±0.284,较其他对照组均明显降低(P＜0.05,P＜0.01)；G0/G1期细胞为(49.37±1.63)％,增殖指数为(50.60±1.57)％,凋亡指数为22.2％,较其他对照组均明显增高(P ＜0.05,P＜0.01)；凋亡细胞体积明显缩小,表面突起和微绒毛减少,甚至消失,线粒体Rhodamine 123平均荧光强度为719.99±17.08,MMP水平显著下降(P＜0.01).结论 RNA干扰(RNAi)沉默hTERT基因能有效抑抑制SW480肿瘤细胞生长,并降低端粒酶活性,诱导肿瘤细胞凋亡.
其他文献
目的 研究乙醇对人乳腺癌MCF-7细胞放射敏感性的影响及相关机制.方法 将人乳腺癌MCF-7细胞分为4组,对照组(不做任何处理)、乙醇组(乙醇处理)、单纯照射组(6 GyX射线处理)和联
2005年版《慢性乙型肝炎防治指南》[1](简称《指南》)与2010年版《指南》[2]的一个显著差异,是关于慢性乙型肝炎(CHB)的治疗目标.前者提出最大限度地长期抑制或消除HBV,减轻
目的 采用速度编码相位对比磁共振成像( VE-PC MRI)技术评估康复训练对恢复期脑卒中患者小腿骨骼肌动力学特征的改善作用.方法 采用随机数字表法将27例恢复期脑卒中偏瘫患者
目的:探讨口腔鳞癌患者血清中可溶性MHC-Ⅰ类链相关蛋白A(soluble major histocompatibility complex class Ⅰ-related chain A,sMICA)的表达水平及其临床意义.方法:选用口
目的 探讨术中持续颅内压(ICP)监测在治疗重型颅脑创伤患者中的应用价值.方法 对我科2008年3月至2010年3月收治的58例重型颅脑创伤患者的术中ICP监测结果进行分析.根据预后情
目的 探讨超声引导下两阶段ERCP治疗妊娠期胆胰急腹症的安全性及疗效.方法 回顾性分析5年多来收治的32例妊娠期胆胰急腹症患者的临床资料.患者分两阶段行ERCP:先在腹部超声引
目的 报道应用无支架全主动脉根部生物瓣膜进行全主动脉根部置换术(Bio-Bentall手术)的早、中期临床效果.方法 回顾2001年11月到2009年3月病例,317例接受Bio-Bentall手术,男1
目的 比较英夫利西升阶梯及降阶梯治疗克罗恩病(CD)的疗效差别.方法 本研究为2007年9月至2010年12月在中山大学附属第一医院进行的前瞻性开放性研究.升阶梯组纳入经常规治疗
目的 探讨干扰素调节因子6 (interferon regulatory factor 6,IRF6)基因rs2235371位点820G＞A单核苷酸多态性与非综合征性唇裂伴或不伴腭裂(nonsyndromic cleft lip with or wi
目的 探讨辛伐他汀预处理对脓毒症大鼠胸主动脉诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及内皮型一氧化氮合酶( eNOS)表达的影响.方法 清洁级雌性Wistar大鼠80只,4月龄,体重200～250 g,采用