目的探究南葶苈子水提物（DS）对H₂O₂诱导的心肌H9c2细胞损伤的保护作用及潜在机制。方法使用高效液相色谱与质谱联用方法分析鉴定DS中主要成分峰。采用H₂O₂处理制备H9c2细胞损伤模型,分为对照组、模型组、普罗布考组及DS 100、200、400μg/m L组,MTT法检测H9c2细胞活力;流式细胞仪检测细胞凋亡率、细胞自噬水平、线粒体膜电位;试剂盒检测细胞氧化应激相关指标;Incell-Western法检测凋亡通路关键蛋白和自噬标志性蛋白表达水平。结果共分析鉴定了DS中含量最高的7种成分。与模型组比较,DS可以提高H9c2细胞活力（P<0.05、0.01）与细胞存活率（P<0.01）,改善线粒体膜电位水平（P<0.01）,调节凋亡通路关键蛋白Caspase-3和Bax/Bcl-2蛋白表达（P<0.01）,抑制心肌细胞凋亡;并能极显著降低细胞自噬水平（P<0.01）,升高自噬标志性蛋白自噬微管相关蛋白轻链3B（LC3B）、p62表达水平（P<0.01）,抑制心肌细胞自噬;降低心肌活性氧（ROS）水平（P<0.01）,调节细胞内超氧化物歧化酶（SOD）活性、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及乳酸脱氢酶（LDH）、丙二醛（MDA）水平（P<0.01）,改善心肌细胞氧化应激。结论 DS可以有效保护由H₂O₂引起的H9c2细胞损伤,其机制可能与改善细胞的氧化应激、抑制细胞凋亡和自噬有关,其物质基础可能与所含的黄酮苷类成分有关。