目的 观察RU486可调控慢病毒介导的小鼠白细胞介素-12(mIL-12)基因对小鼠结肠癌C26细胞移植瘤生长和微血管形成的影响.方法 应用分子同源重组技术构建、包装能表达mIL-12的RU486可调控慢病毒LV-RUmIL-12.将LV-RUmIL-12重组慢病毒感染C26细胞,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测不同浓度RU486调控下mIL-12在C26细胞中的表达.构建小鼠结肠癌C26细胞皮下移植瘤模型,将100只小鼠分为5组[磷酸盐缓冲液组(PBS组)、空白慢病毒组(LV组)、RU486组、LV-RUmIL-12组和LV-RUmIL-12-RU486组],观察小鼠肿瘤生长情况.21 d后处死小鼠,检测小鼠血清mIL-12水平,摘除瘤体,称瘤重,免疫组织化学方法检测肿瘤微血管密度(MVD)和淋巴细胞浸润情况.结果 成功构建、包装RU486可调控慢病毒LV-RUmIL-12.LV-RUmIL-12慢病毒感染C26细胞后,1×10-5 mol/L的RU486可诱导1×106个细胞产生(148±25) μg/L的mIL-12蛋白.LV-RUmIL-12-RU486、PBS、LV、RU486、LV-RUmIL-12组小鼠血清mIL-12水平分别为(3 572.60±245.60)、(145.43±13.53)、(134.53±12.86)、(147.32±15.56)和(139.67±14.84) μg/L,LV-RUmIL-12-RU486组mIL-12水平显著增高(P＜0.05).RU486诱导下的LV-RUmIL-12慢病毒能够抑制小鼠C26细胞移植瘤的生长,抑瘤率达72.59％;LV-RUmIL-12-RU486组移植瘤组织MVD(12.5±4.3)少于PBS (45.5±5.7)、LV (39.5±3.7)、RU486(42.4±7.5)和LV-RUmIL-12组(47.2±2.6),差异有统计学意义(P＜0.05);LV-RUmIL-12-RU486组肿瘤组织中CD4+和CD8+淋巴细胞浸润较对照组增多,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 携带mIL-12基因的RU486可诱导慢病毒能够有效抑制小鼠结肠癌皮下移植瘤微血管生成,对结肠癌的生长有明显的抑制作用。
可调控慢病毒介导白细胞介素-12治疗结肠癌的研究
【摘 要】
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目的 观察RU486可调控慢病毒介导的小鼠白细胞介素-12(mIL-12)基因对小鼠结肠癌C26细胞移植瘤生长和微血管形成的影响.方法 应用分子同源重组技术构建、包装能表达mIL-12的RU486可调控慢病毒LV-RUmIL-12.将LV-RUmIL-12重组慢病毒感染C26细胞,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测不同浓度RU486调控下mIL-12在C26细胞中的表达.构建小鼠结肠癌C26细胞
【机 构】
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223300淮安,南京医科大学附属淮安第一医院胃肠外科,223300淮安,南京医科大学附属淮安第一医院胃肠外科,223300淮安,南京医科大学附属淮安第一医院消化内科,223300淮安,南京医科大学附
【出 处】
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中华实验外科杂志
【发表日期】
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2014年31期
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