【摘 要】
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在液氮中研磨小麦幼叶和不同发育时期的种子 ,经含 0 .1%SDS和 0 .1%十二烷基肌氨酸钠 (LDS)的尿素缓冲液裂解后 ,醋酸钠和氯仿沉淀变性蛋白质 ,异丙醇沉淀核酸 ,溶解后经 2
【基金项目】
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国家转基因专项 (J99-A -0 37)农杆菌介导小麦转化技术的研究
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在液氮中研磨小麦幼叶和不同发育时期的种子 ,经含 0 .1%SDS和 0 .1%十二烷基肌氨酸钠 (LDS)的尿素缓冲液裂解后 ,醋酸钠和氯仿沉淀变性蛋白质 ,异丙醇沉淀核酸 ,溶解后经 2 .5mol/LLiCl沉淀总RNA ,洗涤后就可得到高质量的总RNA ,其OD2 60 /OD2 80 为 2 .0 5～ 2 .10 ,2 8S和 18SRNA带清晰 ,叶片总RNA还可得到 2 3S和 16SRNA带 ,产率可达 5mgRNA/ 10g材料。当使用含 1%SDS和 1%LDS的尿素缓冲液裂解材料时 ,则可用于DNA的分离提取 ,其分子大小可达 5 0～ 10 0kb以上。
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