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目的:筛选能够水解百药煎原料中鞣质并生成没食子酸的最佳混菌发酵组合。方法:以百药煎传统炮制过程中分离纯化获得具有降解鞣质能力的微生物作为筛选出发菌种库,分别进行单菌发酵和混菌发酵,以HPLC方法检测发酵液中没食子酸或鞣质的含量,筛选发现单菌最强菌株及具有协同增强降解鞣质生成没食子酸能力的最佳混菌组合。结果:发现4个菌(HMB5、HMB2、HMY1、HMY2)形成的组合为协同降解百药煎中鞣质并生成没食子酸的最佳组合,该组合固态发酵后样品中没食子酸的量为0.59 g·g-1样品,而百药煎传统炮制样品中没食子酸含量为0.52 g·g-1样品,增加了11%;该混菌组合发酵样品的抗菌活性优于百药煎传统炮制品。结论:筛选得到的最优混菌组合工艺优于百药煎传统自然发酵工艺,为实现百药煎的现代工业化生产提供了菌群基础。