观察血必净注射液对盲肠结扎穿孔(CLP)手术诱导的脓毒症模型大鼠急性肺损伤(ALI)的治疗作用并探讨可能的分子机制。
方法(1)体内实验。110只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组(30只)、CLP模型组(40只)和血必净治疗组(40只)。观察造模后7 d内各组动物存活率，同时于造模后12 h处死大鼠，腹主动脉取血检测炎症因子和血气指标，肺组织取材检测炎症介质mRNA表达、炎症信号分子活化、肺干/湿重比值以及病理组织观察。(2)体外实验。将分离的大鼠外周血中性粒细胞分为阴性对照组、血必净高剂量组(1∶30)、脂多糖(LPS)刺激组(100 ng/ml)、LPS＋血必净低(1∶300)、中(1∶100)和高剂量组，检测各组上清肿瘤坏死因子(TNF)－α、白细胞介素(IL)－6和弹性蛋白酶(NE)的水平及胞浆炎症信号分子的活化状态。
结果存活观察结果显示，CLP模型组建模后死亡率为65%，血必净治疗组死亡率为30%(P<0.01)。与假手术组比较，CLP模型组建模后12 h血清TNF－α和IL－6水平升高至(32.213±9.802)pg/ml和(21.592±5.427)ng/ml，动脉血二氧化碳分压(PaCO2)和乳酸水平上升至(39.575±5.295)mmHg和(3.438±0.192)mmol/L(P<0.01)，TNF－α和IL－6的mRNA相对表达值增加至(5.223±0.525)倍和(12.097±2.535)倍(P<0.01)，IκBα和p38、细胞外调节蛋白激酶(ERK)和c－Jun氨基末端激酶(JNK)的活化水平也明显上调，肺组织含水量显著增加至(78.226±0.894)%(P<0.01)，并出现肺泡腔出血、渗出和肺泡间隔中性粒细胞浸润等典型的急性炎性肺损伤改变。与CLP模型组比较，血必净治疗组血清TNF－α和IL－6显著降低至(21.592±5.427)pg/ml和(2.252±0.905)ng/ml，PaCO2、乳酸水平也明显降低至(34.088±2.260)mmHg和(2.563±0.250)mmol/L，血清TNF－α和IL－6的相对表达值降低至3.398±0.334和6.866±1.604、肺组织含水量减少至(77.159±0.626)%(P<0.05或0.01)。血必净治疗组急性炎症所致的肺组织病理损伤也较CLP模型组显著减轻。体外实验结果显示，阴性对照组和血必净高剂量组TNF－α、IL－6和NE均为基础水平，LPS刺激组TNF－α、IL－6和NE分别升高至(7 102.520±528.026)pg/ml、(3 109.598±191.291)pg/ml和(63.985±2.823)ng/ml，较阴性对照组差异有统计学意义(P<0.01)。LPS＋血必净中、高剂量组TNF－α、IL－6和NE水平较LPS刺激组显著降低(P<0.05或0.01)。LPS刺激组胞浆IκBα的降解和p38及ERK的磷酸化水平也明显增加，而LPS＋血必净高剂量组IκBα的降解和p38、ERK的磷酸化均受到抑制。
结论CLP大鼠术后出现典型的ALI，给予血必净注射液干预能有效降低大鼠体内炎症介质的释放，改善CLP大鼠的ALI，且该效应可能与其抑制中性粒细胞在肺组织的炎性活化密切相关。