【摘 要】
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从马立克氏病病毒(MDV)不同致病型毒株meq基因序列、meq基因产物及其细胞内表达特性和meq蛋白生物学功能的研究探讨马立克氏病病毒致瘤基因meq功能。完成了648A、CVI988/Risp
【机 构】
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广西大学动物科技学院南宁市大学路100号530005,山东农业大学山东泰安271018,AvianDiseasesandOncologyLaboratory
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(39860055,39870008);广西自然科学基金项目(桂科自981101)资助。
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从马立克氏病病毒(MDV)不同致病型毒株meq基因序列、meq基因产物及其细胞内表达特性和meq蛋白生物学功能的研究探讨马立克氏病病毒致瘤基因meq功能。完成了648A、CVI988/Rispens、814、广西地方毒株G2、N、0093、0095、0297、0304共9个MDV毒株meq基因的序列测定。MDV不同致病型毒株的。meq基因序列相对比较保守,它们相互间核苷酸和氨基酸序列的同源性均很高;与所有7个致瘤的MDV毒株相比,在2个MDV-1弱毒疫苗CVl988/Rispens株和814株发现有二个特征性位点突变;此外,还在其ORF中首次发现含15个氨基酸残基(EELCAQLCSTPPPPI)的2个重复和含6个氨基酸残基(PPICTP)的4个重复,全分布在MEQ蛋白C-端的转录激活域内。MEQ蛋白的表达仅局限于感染细胞的核内,而且随感染时间增加,具有从核质向核仁和核膜转移趋向;Western Blotting和免疫沉淀试验证实重组杆状病毒感染细胞裂解物中有大小约为60 kD的特异带。利用表达的MEQ蛋白产物免疫BALB/c小鼠,获得的杂交瘤细胞被克隆并与MDV感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)做免疫荧光试验(FA),获得4株稳定产生抗MEQ蛋白单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞,其中3G12E6单克隆抗体能够检测到MDV致瘤株感染的CEF及自然MD肿瘤细胞中表达的meq基因产物,而CVl988/Rispens感染的细胞则未检测到。发现细?
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