【摘 要】
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利用PCR从甘蓝型油菜(Brassica napusL.)华双4号基因组DNA中扩增出种子储藏蛋白cruc iferin、nap-in、oleosin和丙酮酸羧化酶(PEPC)基因片段,再以扩增出的片段为模板设计引物
【机 构】
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湖北大学生命科学学院植物遗传育种实验室,湖北大学生命科学学院植物遗传育种实验室,湖北大学生命科学学院植物遗传育种实验室,湖北大学生命科学学院植物遗传育种实验室,湖北大学生命科学学院植物遗传育种实验室
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利用PCR从甘蓝型油菜(Brassica napusL.)华双4号基因组DNA中扩增出种子储藏蛋白cruc iferin、nap-in、oleosin和丙酮酸羧化酶(PEPC)基因片段,再以扩增出的片段为模板设计引物从一端扩增出4个相应的小片段,然后将同一基因的大小两个片段反向连接,插入到种子特异表达载体2300-nap多克隆位点的nap in启动子和nos终止子之间,构建成可以在油菜种子中转录表达发夹RNA(Hairp in RNA,hpRNA)结构的植物表达载体。
The gene fragments of cruc iferin, nap-in, oleosin and pyruvate carboxylase (PEPC) were amplified from genomic DNA of Brassica napus L. Brassica napus L. by PCR and amplified by PCR Fragment was used as the template to amplify four corresponding small fragments from one end and then the two fragments of the same gene were reversely ligated into the napin promoter and nos of the multi-cloning site of seed-specific expression vector 2300-nap Terminator, and constructed into a plant expression vector that can express the structure of hairp in RNA (hpRNA) in rapeseed.
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