不同链长脂肪酸对胎盘滋养细胞氧化应激和炎症反应的影响

来源 :中华妇产科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:harryvincent
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目的 探讨不同链长脂肪酸对胎盘滋养细胞氧化应激和炎症反应的影响.方法 体外培养胎盘滋养细胞,将细胞分为5组,每组加入不同链长的脂肪酸孵育细胞,即分别为无游离脂肪酸( FFA-free,F-FFA)组、短链脂肪酸(SC-FFA)组、中链脂肪酸(MC-FFA)组、长链脂肪酸(LC-FFA)组、极长链脂肪酸(VLC-FFA)组.每组再分别以DMEM培养基、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶抑制剂(NADPH-Ⅰ)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)抑制剂(p38MAPK-Ⅰ)孵育细胞.采用实时荧光定量PCR技术和蛋白印迹法检测各组细胞p38MAPK和环氧合酶2(COX-2)mRNA和蛋白的表达变化.结果 (1)LC-FFA组+DMEM、VLC-FFA组+DMEM、LC-FFA组+NADPH-1、LC-FFA组+p38MAPK-Ⅰ、VLC-FFA组+NADPH-Ⅰ 、VLC-FFA组+p38MAPK-Ⅰ胎盘滋养细胞p38MAPK mRNA的表达量分别为4.56±0.28、22.65±2.40、0.87 ±0.06、1.02 ±0.15、19.87±1.93、10.22±0.75,蛋白的表达量分别为0.79 ±0.02、0.93 ±0.10、0.43 ±0.06、0.44±0.19、0.79±0.10、0.81± 0.14. LC-FFA组+DMEM、VLC-FFA组+DMEM细胞p38MAPK mRNA和蛋白的表达量升高(P<0.05).与LC-FFA组+DMEM比较,LC-FFA组+NADPH-Ⅰ、LC-FFA组+p38MAPK-Ⅰ细胞p38MAPK mRNA和蛋白的表达量明显降低(P<0.05).与VLC-FFA组+DMEM比较,VLC-FFA组+NADPH-Ⅰ细胞p38MAPK mRNA和蛋白的表达量差异无统计学意义(P>0.05);VLC-FFA组+p38MAPK-Ⅰ细胞p38 MAPK mRNA的表达量明显降低(P<0.05),而蛋白的表达量无差异(P>0.05).(2) LC-FFA组+DMEM、VLC-FFA组+DMEM、LC-FFA组+NADPH-Ⅰ、LC-FFA组+p38MAPK-Ⅰ、VLC-FFA组+NADPH-Ⅰ、VLC-FFA组+p38MAPK-Ⅰ细胞COX-2 mRNA的表达量分别为3.97 ±0.03、39.08±0.63、0.99 ±0.13、0.98 ±0.18、20.93±3.70、13.46±2.31,蛋白的表达量分别为1.32±0.20、1.33±0.25、0.59 ±0.13、0.58±0.30、0.88 ±0.18、0.91 ±0.24.与其他组比较,COX-2 mRNA和蛋白的表达量在LC-FFA组+DMEM、VLC-FFA组+DMEM细胞明显升高(P<0.05).与LC-FFA组+DMEM比较,LC-FFA组+NADPH-Ⅰ、LC-FFA组+p38MAPK-Ⅰ细胞COX-2 mRNA和蛋白的表达量明显降低(P<0.05).与VLC-FFA组+DMEM比较,VLC-FFA组+NADPH-Ⅰ、VLC-FFA组+p38MAPK-Ⅰ细胞COX-2 mRNA和蛋白的表达量均降低(P<0.05).(3)相关性分析显示,在LC-FFA组中p38MAPK与 COX-2在mRNA和蛋白水平上均呈正相关(r=0.657、0.916,P<0.05).在F-FFA、SC-FFA、MC-FFA、VLC-FFA组中,p38 MAPK与COX-2在mRNA水平上无相关性(P>0.05),而在蛋白水平上呈正相关(P<0.05).结论 LC-FFA和VLC-FFA刺激下的胎盘滋养细胞中存在氧化应激和炎症反应,该过程有p38MAPK信号通路参与。

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