新城疫活疫苗HB92克隆株的筛选、纯化与细胞培养特性观察

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将引进的新城疫V4无毒耐热毒株连续用鸡胚传代,每次挑选48~96h有明显病变的死亡鸡胚.取其尿囊液毒于-20℃保存,观察V4毒株对鸡胚毒力的病理变化。结果显示.经过20代次的鸡胚毒力筛选,V4毒株对鸡胚的致死率从小于10%上升至20%以上.接种后120h的活胚有明显地萎缩症状、将鸡胚20代次以上筛选的V4病毒液在鸡胚成纤维细胞上传代培养,并进行蚀斑筛选纯化病毒.直到第5代才出现明显地细胞病变。使用二层琼脂进行病毒的蚀斑分析.第二层琼脂糖在第一层凝固后72h覆盖,8h后NDV鸡胚成纤维细胞适应株的蚀虎出现.
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