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【摘 要】目的：对美国雅培公司化学发光微粒子免疫检测法测定丙型肝炎病毒抗体的精密度、灵敏度和特异性等进行验证和评价 方法：分别使用美国临床和实验室标准化协会（CLSI）发布的EP5-A2、EP-17A对其精密度和灵敏度进行评价，使用HCV抗体免疫印迹检测确认试验对其特异性进行评价 结果：化学发光法的检测丙型肝炎病毒抗体精密度、灵敏度和特异性与厂家数据一致 结论：美国雅培公司化学发光法测定丙型肝炎病毒抗体的性能符合要求。
【关键词】丙型肝炎病毒抗体；化学发光微粒子免疫检测法；性能验证
【中图分类号】R512 【文献标识码】A 【文章编号】1004—7484（2013）11—0182—01
丙型肝炎病毒（HCV）是一种经血液传播的病毒。血清学研究中通过酶免疫测定检测针对重组HCV抗原的抗体，将HCV确定为引起大部分血源性和社区获得性非甲型、非乙型肝炎的病因。HCV抗体的存在表明个体可能已感染HCV、可能携带传染性HCV和（或）可能会传播HCV病毒。虽然大部分感染者没有症状，但是HCV感染可能会发展成为慢性肝炎、肝硬化和（或）增加罹患肝细胞性肝癌的风险。通过酶免疫测定技术对献血者进行筛查可以明显减少输血传播肝炎的风险。化学发光微粒子免疫检测法（CMIA）是近年来美国雅培等公司推出的丙型肝炎病毒抗体测定方法，特点是简便、准确，其性能评价数据多来自于雅培公司提供，本文就其在敏感性、特异性以及与其他常用方法结果符合性等方面主要根据ISO15189医学实验室质量和能力认可准则临床免疫学检验领域指南的要求对美国雅培公司丙型肝炎病毒抗体化学发光微粒子免疫检测法测定的 精密度、灵敏度和特异性进行验证和评价。
1 资料与方法
l.l 仪器与试剂 使用美国雅培ARCHITECT-i2000 System ，试剂为雅培配套试剂ARCHITECT SYSTEM Anti-HCV 。
l.2 检测对象与方法 验证美国雅培ARCHITECT-i2000 System检测系统，分别使用美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）有关指南文件EP5-A2（临床化学设备精密度性能的评价）和EP-17A（极限参数指南）对其方法的精密度和灵敏度进行评价。
l.2.1 精密度评价 确认仪器运转良好，试剂在效期内且定标通过，室内质控在控。每天测定三个批次实验样本，样本为北京市临床检验中心室间质评血清-20℃冷冻保存，每批次重复测定4次，连续测定5d。每天在检测开始和结束时将阳性质控品各检测两次。批内、批间、总标准偏差（SD）和百分比变异系数（%CV）通过用于随机效应模型的方差分量分析确定。
1.2.2灵敏度评价 确认仪器运转良好，试剂在效期内且定标通过，室内质控在控。对总共117份样本，包括50份慢性HCV感染个体样本、42份HCV抗体和HCV RNA阳性个体样本和25份HCV感染高风险个体的样本进行检测，其中100份样本在复检中呈反应性并且在补充试验中呈HCV抗体阳性。
1.2.3特异性评价 使用本院过去24个月中经免疫印迹确认的412份阳性患者标本和120例阴性对照组标本对其特异性进行评价。
1.3统计学处理 精密度和灵敏度测定数据类型为计数资料，以频数和相对数形式表示（%）， 用SPSS11.5统计软件进行分析采用X2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1精密度结果见表一。
a 批间变异包括批内变异
b 总检测变异包括批内、批间、批号间、仪器间变异。
2.2灵敏度结果见表二。
3 讨论
丙型肝炎病毒是引起输血后非甲非乙型肝炎（NANBH）的主要病原体，输血后肝炎的90%以上是由其引起的。丙型肝炎临床表现与乙型肝炎相似，但症状更不明显，且更容易演变为慢性、肝硬化和肝癌，其感染早世界性分布，目前，全球约1.7亿人感染HCV，感染率约为3%1。而且，目前尚无有效的丙型肝炎疫苗可利用，因此对人类的健康和生命危害极大，成为了严重的社会和公共卫生安全问题。所以，对献血员的筛查和对HCV感染者的早期诊断是顶防和控制丙型肝炎的最有效措施及方法。目前，ELISA检测HCV抗体作为血液丙型病毒传染指标的主要检测手段，其检测结果的可靠性至关重要。近几年，随着化学发光免疫检测法大幅发展，应用CMIA检测丙型肝炎病毒抗体越来越多的应用于临床实验室，其精密度高，灵密度、特异性均高于ELISA检测，为提高丙型肝炎病毒抗体阳性率提供了保证。
丙肝抗体测定是常用于判断丙肝病毒是否感染的初筛试验，其测定的正确性具有重要的临床意义。生产厂家提供了精密度、灵敏度、阴阳符合率等指标，但是，这些参数都是厂家在最佳条件下完成的，每个实验室应按照各自的检测系统进行验证评价或建立方法学性能参数旧。精密度是检验项目测定中最基本的性能指标，在实际工作中，对定量试验研究的较多，而定性试验涉足的较少。临床免疫学室内质控CV的控制规定：ng级可接受的cV在30%2。我们检测的丙肝抗体不精密度的CV<15%，说明ARCHITECT 检测系统是稳定可靠的。对于定性试验，不能使用正确度来评价分析其与真值的偏倚情况，只能使用阴性、阳性符合率来说明结果的准确程度，符合率为100%。
本研究根据中国合格评定国家认可委员会 CNAS 中对方法学的要求，选定目前国内外常用的CLSL系列标准文件3对CMIA检测丙型肝炎病毒抗体的性能进行了验证 结果与厂家声称数据基本一致，达到了对其方法学验证的目的，证明了CMIA测定丙型肝炎病毒抗体的性能符合要求。
参考文献：
[1] Shepard CW，Finelli L，Alter MJ.Global epidemiology of hepatitis C virus infection[J].Lancet Infect Dis，2005，5（9）：558—567[3]
[2] 免疫學及其检验技术.人民卫生出版社.
[3] 杨志钊 缪丽韶 杨山虹 等.利用CLSLEP15-A指南验证精密度和准确度 [J] .国际检验医学杂志 2010 31 3 231-232.
【关键词】丙型肝炎病毒抗体；化学发光微粒子免疫检测法；性能验证
【中图分类号】R512 【文献标识码】A 【文章编号】1004—7484（2013）11—0182—01
丙型肝炎病毒（HCV）是一种经血液传播的病毒。血清学研究中通过酶免疫测定检测针对重组HCV抗原的抗体，将HCV确定为引起大部分血源性和社区获得性非甲型、非乙型肝炎的病因。HCV抗体的存在表明个体可能已感染HCV、可能携带传染性HCV和（或）可能会传播HCV病毒。虽然大部分感染者没有症状，但是HCV感染可能会发展成为慢性肝炎、肝硬化和（或）增加罹患肝细胞性肝癌的风险。通过酶免疫测定技术对献血者进行筛查可以明显减少输血传播肝炎的风险。化学发光微粒子免疫检测法（CMIA）是近年来美国雅培等公司推出的丙型肝炎病毒抗体测定方法，特点是简便、准确，其性能评价数据多来自于雅培公司提供，本文就其在敏感性、特异性以及与其他常用方法结果符合性等方面主要根据ISO15189医学实验室质量和能力认可准则临床免疫学检验领域指南的要求对美国雅培公司丙型肝炎病毒抗体化学发光微粒子免疫检测法测定的 精密度、灵敏度和特异性进行验证和评价。
1 资料与方法
l.l 仪器与试剂 使用美国雅培ARCHITECT-i2000 System ，试剂为雅培配套试剂ARCHITECT SYSTEM Anti-HCV 。
l.2 检测对象与方法 验证美国雅培ARCHITECT-i2000 System检测系统，分别使用美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）有关指南文件EP5-A2（临床化学设备精密度性能的评价）和EP-17A（极限参数指南）对其方法的精密度和灵敏度进行评价。
l.2.1 精密度评价 确认仪器运转良好，试剂在效期内且定标通过，室内质控在控。每天测定三个批次实验样本，样本为北京市临床检验中心室间质评血清-20℃冷冻保存，每批次重复测定4次，连续测定5d。每天在检测开始和结束时将阳性质控品各检测两次。批内、批间、总标准偏差（SD）和百分比变异系数（%CV）通过用于随机效应模型的方差分量分析确定。
1.2.2灵敏度评价 确认仪器运转良好，试剂在效期内且定标通过，室内质控在控。对总共117份样本，包括50份慢性HCV感染个体样本、42份HCV抗体和HCV RNA阳性个体样本和25份HCV感染高风险个体的样本进行检测，其中100份样本在复检中呈反应性并且在补充试验中呈HCV抗体阳性。
1.2.3特异性评价 使用本院过去24个月中经免疫印迹确认的412份阳性患者标本和120例阴性对照组标本对其特异性进行评价。
1.3统计学处理 精密度和灵敏度测定数据类型为计数资料，以频数和相对数形式表示（%）， 用SPSS11.5统计软件进行分析采用X2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1精密度结果见表一。
a 批间变异包括批内变异
b 总检测变异包括批内、批间、批号间、仪器间变异。
2.2灵敏度结果见表二。
3 讨论
丙型肝炎病毒是引起输血后非甲非乙型肝炎（NANBH）的主要病原体，输血后肝炎的90%以上是由其引起的。丙型肝炎临床表现与乙型肝炎相似，但症状更不明显，且更容易演变为慢性、肝硬化和肝癌，其感染早世界性分布，目前，全球约1.7亿人感染HCV，感染率约为3%1。而且，目前尚无有效的丙型肝炎疫苗可利用，因此对人类的健康和生命危害极大，成为了严重的社会和公共卫生安全问题。所以，对献血员的筛查和对HCV感染者的早期诊断是顶防和控制丙型肝炎的最有效措施及方法。目前，ELISA检测HCV抗体作为血液丙型病毒传染指标的主要检测手段，其检测结果的可靠性至关重要。近几年，随着化学发光免疫检测法大幅发展，应用CMIA检测丙型肝炎病毒抗体越来越多的应用于临床实验室，其精密度高，灵密度、特异性均高于ELISA检测，为提高丙型肝炎病毒抗体阳性率提供了保证。
丙肝抗体测定是常用于判断丙肝病毒是否感染的初筛试验，其测定的正确性具有重要的临床意义。生产厂家提供了精密度、灵敏度、阴阳符合率等指标，但是，这些参数都是厂家在最佳条件下完成的，每个实验室应按照各自的检测系统进行验证评价或建立方法学性能参数旧。精密度是检验项目测定中最基本的性能指标，在实际工作中，对定量试验研究的较多，而定性试验涉足的较少。临床免疫学室内质控CV的控制规定：ng级可接受的cV在30%2。我们检测的丙肝抗体不精密度的CV<15%，说明ARCHITECT 检测系统是稳定可靠的。对于定性试验，不能使用正确度来评价分析其与真值的偏倚情况，只能使用阴性、阳性符合率来说明结果的准确程度，符合率为100%。
本研究根据中国合格评定国家认可委员会 CNAS 中对方法学的要求，选定目前国内外常用的CLSL系列标准文件3对CMIA检测丙型肝炎病毒抗体的性能进行了验证 结果与厂家声称数据基本一致，达到了对其方法学验证的目的，证明了CMIA测定丙型肝炎病毒抗体的性能符合要求。
参考文献：
[1] Shepard CW，Finelli L，Alter MJ.Global epidemiology of hepatitis C virus infection[J].Lancet Infect Dis，2005，5（9）：558—567[3]
[2] 免疫學及其检验技术.人民卫生出版社.
[3] 杨志钊 缪丽韶 杨山虹 等.利用CLSLEP15-A指南验证精密度和准确度 [J] .国际检验医学杂志 2010 31 3 231-232.