【摘 要】
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目的 探讨不同剂量细粒棘球蚴感染对小鼠脾脏NKT细胞(natural killer T cells)免疫功能的影响.方法 经肝门静脉注射细粒棘球蚴建立C57BL/6小鼠感染模型,对照组注射生理盐水.感染组分为低剂量组(50个原头蚴,LD)、中剂量组(500个原头蚴,MD)和高剂量组(2000个原头蚴,HD).于造模后12周采集小鼠肝脏和脾脏标本,采用HE及Masson染色检查肝脏病灶和纤维化程度;采用流式细胞术检测小鼠脾脏NKT细胞表型、不同NKT亚群比例,以及相关细胞因子(IFN-γ、IL-4、IL-1
【机 构】
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新疆医科大学基础医学院,乌鲁木齐830011;新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室;新疆农业大学动物医学学院;新疆医科大学基础医学院,乌鲁木齐830011;
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目的 探讨不同剂量细粒棘球蚴感染对小鼠脾脏NKT细胞(natural killer T cells)免疫功能的影响.方法 经肝门静脉注射细粒棘球蚴建立C57BL/6小鼠感染模型,对照组注射生理盐水.感染组分为低剂量组(50个原头蚴,LD)、中剂量组(500个原头蚴,MD)和高剂量组(2000个原头蚴,HD).于造模后12周采集小鼠肝脏和脾脏标本,采用HE及Masson染色检查肝脏病灶和纤维化程度;采用流式细胞术检测小鼠脾脏NKT细胞表型、不同NKT亚群比例,以及相关细胞因子(IFN-γ、IL-4、IL-10及IL-17A)的表达情况.结果 不同剂量细粒棘球蚴感染组小鼠肝脏均可见囊泡结构样病灶,病灶周围出现胶原沉积,对照组肝脏仅汇管区可见少量胶原沉积.中、高剂量感染组小鼠脾脏NKT细胞比例分别为(1.34±0.27)％和(1.33±0.21)％,与对照组(2.54±0.43)％和低剂量组(2.41±0.53)％比较差异有统计学意义(F=16.451,P＜0.05).中、高剂量感染组小鼠脾脏CD69+ CD4+ NKT细胞比例分别为(15.6±2.00)％和(17.5±3.98)％,与对照组(11.1±2.82)％和低剂量组(11.1±1.31)％比较差异有统计学意义(F=8.130,P＜0.05).高剂量感染组小鼠脾脏CD69,CD8+ NKT细胞比例为(70.1±7.52)％,与对照组(85.3±2.68)％和低剂量组(83.1±3.90)％比较差异有统计学意义(F=12.42,P＜0.05).中、高剂量感染组小鼠脾脏CD69+ DN NKT细胞比例分别为(29.3±2.02)％和(27.2±5.20)％,与对照组(35.6±4.26)％比较差异有统计学意义(F=3.277,P＜0.05).中、高剂量感染组小鼠脾脏NKT1型细胞分泌IFN-γ比例低于对照组和低剂量组(F=40.00,P＜0.01).高剂量感染组小鼠脾脏NKT2型细胞分泌IL-4比例高于对照组、低剂量组和高剂量组(F=10.54,P＜0.001).中、高剂量感染组脾脏NKT17型细胞分泌IL-17A比例低于对照组和低剂量组(F=13.00,P＜0.01).低、中、高剂量感染组脾脏NKT10型细胞分泌IL-10比例高于对照组(F=45.59,P＜0.01).中、高剂量感染组脾脏CD4+ NKT1型细胞分泌IFN-γ比例分别为(14.55±2.12)％和(10.43±0.85)％,与对照组(25.88±6.82)％和低剂量组(22.13±4.36)％比较差异有统计学意义(F=16.73,P＜0.01).低、中、高剂量感染组脾脏CD4+ NKT2型细胞分泌IL-4比例分别为(10.14±1.00)％、(10.64±0.73)％和(12.97±1.66)％,与对照组(7.07±0.72)％比较差异有统计学意义(F=19.99,P＜0.01).中、高剂量感染组脾脏CD4+ NKT17型细胞分泌IL-17A比例分别为(2.46±0.72)％和(2.26±0.57)％,与对照组(4.11±1.07)％和低剂量组(4.56±0.91)％比较差异有统计学意义(F=10.54,P＜0.01).低、中、高剂量感染组脾脏CD4+NKT10型细胞分泌IL-10比例分别为(8.42±1.38)％、(12.65±4.19)％和(15.7±3.72)％,与对照组(4.66±0.87)％比较差异有统计学意义(F=15.78,P＜0.01).中、高剂量感染组脾脏CD8+ NKT型细胞分泌IFN-γ比例与对照组和低剂量组比较差异有统计学意义(F=20.08,P＜0.01).低、中、高剂量感染组脾脏CD8+ NKT型细胞分泌IL-10与高于对照组比较差异有统计学意义(F=24.41,P＜0.01或P＜0.001).中、高剂量感染组脾脏DN NKT型细胞分泌IFN-γ比例与对照组和低剂量组比较差异有统计学意义(F=26.82,P＜0.01).低、中、高剂量感染组脾脏DN NKT型细胞分泌IL-10比例与对照组比较差异有统计学意义(F=22.96,P＜0.05).结论 细粒棘球蚴感染中期,不同剂量感染诱导小鼠机体产生的细胞免疫反应由NKT1型和NKT17型模式转向NKT2型和NKT10型亚群优势,导致NKT细胞亚群之间的偏移失衡,造成细粒棘球蚴在宿主体内慢性寄生.
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