雷公藤4个环氧角鲨烯环化酶基因克隆与表达分析

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jinjiajie
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
雷公藤(Tripterygium wilfordii)作为重要的药用植物,具有抗癌、抗炎和免疫调节等作用,并具有较强的杀虫活性。雷公藤红素(celastrol)是雷公藤最具代表性的三萜物质,药理活性高且作用广泛,极具开发价值。环氧角鲨烯环化酶(oxidosqualene cyclase, OSC)被认为是三萜类次生代谢途径中的关键限速酶,是三萜合成生物学研究的重要元件之一。根据前期对雷公藤根转录组数据的分析设计引物,克隆得到4个雷公藤OSC基因:TwOSC1 (GenBank No. MH412928)、TwOSC2 (GenBank No. MH412929)、TwOSC3(GenBank No. MH412930)和TwOSC4 (GenBank No. MH412931)。TwOSC1~3的ORF均为2 289 bp,编码762个氨基酸;TwOSC4的ORF为2 280 bp,编码759个氨基酸。生物信息学分析表明,4个TwOSC蛋白序列相似性较高,多重序列两两比对相似性在53%~77%之间。分子进化树分析表明,TwOSC1与多个物种的β-香树素合成酶聚为一个分支,TwOSC2、TwOSC4与环阿屯醇合成酶聚为一个分支,TwOSC3与羽扇豆醇合成酶聚为一个分支。以qRT-PCR方法检测上述基因在雷公藤不同组织部位的表达模式,结果显示,TwOSC1基因只在根中表达,TwOSC2、TwOSC3和TwOSC4在不同组织中均有表达。进而以茉莉酸甲酯(methyl jasmonate, MeJA)诱导处理雷公藤发状根,可不同程度地增加TwOSC1、TwOSC2、TwOSC4基因表达,同时抑制TwOSC3基因表达。以高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography,HPLC)检测雷公藤发状根中红素的含量变化,经MeJA诱导处理后红素含量有不同程度增加,且MeJA诱导后TwOSC1基因表达量的变化趋势与红素含量的变化趋势一致,推测TwOSC1可能与雷公藤红素的合成有关。本研究为雷公藤三萜活性物质的合成与积累提供了基础资料。
其他文献
目的:观察根管治疗一次法同期根尖手术治疗前牙根尖囊肿的临床疗效。方法:收集2016年1-6月我院口腔科收治的前牙根尖囊肿患者共60例作为观察对象,用随机抽签方法分为对照组和观
阐述了混流式水轮机蜗壳内部流道的光滑性对于整机稳定运行的重要影响。在水轮机金属蜗壳的设计过程中,以模型试验数据为依据,利用CATIA软件的创成式外形设计模块,构建了光滑
O2O电子商务不仅改变了传统商务,而且影响了消费者的行为习惯;在发展迅猛的同时,也存在许多迫切需要解决的问题,例如收益分配问题。为了探索合理的O2O收益分配机制及营销方式
当前面对全球经济增长乏力的经济形势,党和国家领导人顺应形势提出了“一带一路”的经济发展倡议,建议与亚欧等国家建立“丝绸之路经济带”和“21世纪海上丝绸之路”。自从“
以微电子技术和计算机技术为核心技术的电视节目制作设备不断发展,推动了电视节目制作环境从模拟到数字化,从庞大复杂的制作系统到综合性和单机个性化的制作方式变化。本文从
中医对糖尿病的认识源远流长,早在隋唐时期甄立言《古今录验方》中即有消渴病、消中病、肾消的论述。至20世纪80年代,随着国人饮食结构的变化,该病发病率猛增。20余年来,中医
剧本是一剧之本。制作一部动画电影,首先就是从创作动画剧本开始的,它将成为后续每项设计方案的重要依据。动画剧本的质量是决定一部动画影片质量的关键因素。本文从剧本的地
农业作为第一产业,机械化发展是重要趋势,对于农业效率、质量提升具有重要意义。农业机械化现状不容乐观,机械化速度较慢、产品结构单一、操作人员素质不高、机械化方案不健
<正> 祥林嫂是鲁迅奉献给我们时代的一个极为成功的艺术典型。祥林嫂形象所揭示的社会生活的深度与广度,祥林嫂悲剧所具有的深刻的意义,在中外文学史上都是少有的。研究祥林
期刊
基于热连轧机的机械结构和工艺结构,考虑态轧制力对轧机振动的影响,建立了轧机辊系的非线性动态轧制振动模型。根据Lagrange原理,得到了轧机辊系的动力学方程,应用多尺度法求