【摘 要】
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以柿果组织中分离的总RNA为模板,经RT-PCR扩增到约1.1kb的富有柿果ACC合成酶(Fuyu-ACS)的基因片段,将此片段克隆到pGEMR-T easy vector上,经测序分析与Genbank中平核无柿果的
【机 构】
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河北农业大学食品科技学院,河北经贸大学生物工程系,中国农业大学农业生物技术国家实验室
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以柿果组织中分离的总RNA为模板,经RT-PCR扩增到约1.1kb的富有柿果ACC合成酶(Fuyu-ACS)的基因片段,将此片段克隆到pGEMR-T easy vector上,经测序分析与Genbank中平核无柿果的DK-ACS1基因核苷酸序列的同源性为99%.设计了2对带限制性内切酶位点的特异性引物,以测序质粒为模板,PCR扩增到2个ACS-Fuyu片段.2个片段经双酶切消化后,分别以正反2个方向插入到植物表达载体pBI121的35 S启动子和NOS终止子之间,构建成Fuyu-ACS基因的植物表达载体.
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