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由于限制性内切酶在重组表达时具有切割宿主DNA的细胞毒性,生产难度大,其供应一直被国外企业垄断.实验室前期通过广谱甲基化保护,初步实现了部分限制性内切酶的国产化,但工艺仍停留在低密度摇瓶培养水平,产量无法满足市场需求.研究以限制性内切酶PstⅠ为对象,通过单因素试验筛选了诱导温度、诱导时间、诱导剂浓度、补充碳源、pH值与诱导时机等多个发酵条件.结果 表明,在37℃下,开始发酵后6h,添加终浓度1.4 mmol/L IPTG进行诱导发酵8h,以甘油为补充碳源,控制发酵体系pH为8.0时PstⅠ的表达量最高,Pst Ⅰ蛋白产量为0.0129 g/L,为未优化的2.15倍,同时酶产率为1.926×106 U/L,为未优化的3.74倍.