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通过RT—PCR扩增新城疫病毒F基因，利用禽痘病毒复合启动子、SV40 PolyA终止信号序列构建F基因表达盒。将F基因表达盒与loxp—GFP—loxP序列串联插入禽痘病毒重组臂．构建了禽痘病毒转移质粒载体。在脂质体介导下转染CEF，获得了带有绿色荧光信号的重组病毒rFPVFGFP。通过二次转染，利用Cre—loxP位点特异性重组将重组病毒基因组的GFP自动去除．结果获得了只含新城疫病毒F基因表达盒的重组禽痘病毒rFPVF。试验结果表明，rFPVF复制稳定，表达的F蛋白具有免疫原性，能够刺激鸡只产生抗新