不同抗凝剂种类、操作和保存方法对血浆微粒检测影响

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目的探讨不同抗凝剂种类、标本处理方式、保存温度及时间对血浆微粒(MPs)检测效果的影响。方法采集2013年8月—2014年5月在苏州大学附属第二医院住院治疗的40例系统性红斑狼疮患者、41例类风湿性关节炎患者和52名健康对照者血浆标本;采用流式细胞术(FCM)计数不同抗凝剂[枸橼酸盐、乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)、肝素]、标本处理方式[洗涤贫血小板血浆(PPP)和直接PPP]、保存温度(-4、-20、-80℃)及时间(1、3、7、10、14 d)血浆中MPs的含量。结果采用枸橼酸盐、EDTA-K2、肝素抗凝剂和无抗凝剂血浆中MPs含量分别为(1 527.0±620.4)、(981.4±247.9)、(877.7±176.2)和(480.8±112.2)μL,差异有统计学意义(F=9.11,P<0.01);系统性红斑狼疮患者、类风湿性关节炎患者和健康对照者直接PPP MPs含量分别为(1 972.4±2 850.7)、(3 347.8±3431.5)和(2 157.7±1 901.1)μL,均高于洗涤PPP的(1 406.4±2 205.7)、(2 375.6±2 500.2)和(1 502.8±1 337.1)μL(均P<0.01);与新鲜血浆标本MPs含量比较,-4℃、-20℃下血浆标本保存1、3、7、10 d和-80℃下血浆标本保存3、7、10 d MPs含量均下降,差异均有统计学意义(P<0.05);而在3个温度下保存14 d MPs含量开始升高,与新鲜血浆标本MPs含量比较,差异均无统计学意义(P>0.05);分别对3个温度下保存1、3、7、10、14 d血浆标本MPs含量比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论检测血浆MPs含量时宜选用新鲜EDTA-K2抗凝标本且无需多次离心洗涤,短期内标本保存在-4℃、-20℃、-80℃下均可。
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