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革兰氏染色的结果受许多因素的影响,初做该实验的学生不易掌握。为更好地指导学生得到正确的实验结果,分别对菌龄、涂菌量和乙醇脱色等关键影响因素进行了探索。结果显示大肠杆菌革兰氏染色的最佳菌龄是10~24h,金黄色葡萄球菌是10~14h;两种菌的涂片菌量(厚度)为在直径0.5~1.0cm内涂1~2μL的涂片菌液;脱色时间是浸入酒精溶液中脱色20~30s。