微RNA-146a对机械通气大鼠肺损伤TLR4炎症信号通路的影响及机制

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目的

探讨微RNA-146a(miR-146a)对机械通气大鼠肺损伤Toll样受体4(TLR4)炎症信号通路的影响及机制。

方法

32只雄性SD大鼠按随机数字表法随机分为4组各8只:(1)A组(正常对照组):不行机械通气,保留自主呼吸;(2)B组(机械通气损伤组):行机械通气;(3)C组(机械通气损伤+空载病毒转染组):转染空载病毒后行机械通气;(4)D组(机械通气损伤+病毒转染组):病毒转染miR-146a拟似物后行机械通气。机械通气呼吸频率控制在80次/min,潮气量(VT)=40 ml/kg,吸入氧浓度(FiO2)21%,吸呼时间比为1∶2,呼气末正压(PEEP)0;4 h/d,通气7 d。大鼠肺机械通气建立大鼠机械通气肺损伤(VILI)模型;大鼠肺组织石蜡包埋切片后行HE染色,显微镜下观察肺组织形态变化及损伤程度;测肺湿重/干重比值(W/D); ELISA法检测白细胞介素(IL)-1β、IL-2及肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;实时定量-PCR法测TLR4 mRNA相对表达量;Western印迹法测TLR4蛋白相对表达量。

结果

肺组织W/D、肺损伤评分B组[(6.41±0.10)、(11.38±0.92)分]、C组[(6.45±0.19)、(11.75±1.04)分]、D组[(5.95±0.14)、(7.53±4.78)分]均显著大于A组[(4.33±0.08)、(0.25±0.46)分],D组均显著小于C组(均P<0.01);肺组织IL-1β、IL-2及TNF-α水平B组[(36.07±4.28)pg/ml、(5.02±0.63)ng/ml及(382.57±35.41)ng/ml]、C组[(35.82±5.47)pg/ml、(4.98±0.71)ng/ml及(375.13±36.95)ng/ml]、D组[(27.01±3.18)pg/ml、(3.96±0.82)ng/ml及(297.56±39.08)ng/ml]均显著高于A组[(21.46±3.15)pg/ml、(2.45±0.17)ng/ml及(195.92±18.07)ng/ml],D组均显著低于C组(均P<0.01);肺组织TLR4 mRNA、TLR4蛋白相对表达量B组(29.57±5.10、0.75±0.110)、C组(27.27±4.72、0.77±0.130)、D组(12.89±2.58、0.48±0.057)均显著高于A组(1.02±0.13、0.18±0.025),D组显著低于C组(均P<0.01)。B组与C组间上述指标差异均无统计学意义(均P>0.05)。

结论

MiR-146a可降低机械性通气大鼠肺损伤大鼠肺组织急性炎症反应及TLR4表达;MiR-146a可能通过TLR4信号通路抑制机械性通气大鼠肺损伤炎症反应。

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