鸢尾素(Irisin)是新发现的一种肌肉因子,其前体是Ⅲ型纤连蛋白组件包含蛋白5(fibronectin typeⅢdomain-containing protein 5,FNDC5)。为实现人(Homo sapiens)Irisin的原核表达,通过反转录PCR得到人肌肉组织总RNA的c DNA,并以特异性引物扩增得到人FNDC5基因的c DNA序列。以特异性引物扩增将人Irisin基因序列引入NdeⅠ和XhoⅠ酶切位点,经双酶切后插入原核表达载体p ET-30a中,构建重组质粒并转化大肠杆菌(Escherichia coli)Rosetta(DE3)p Lys S。通过异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导表达,进行十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl dulfate polyacrylamide gel electropheresis,SDS-PAGE)检测,用镍柱纯化目的蛋白,并用Western blot方法鉴定。DNA序列分析结果显示,克隆的人Irisin基因序列和NCBI公布的序列一致,并成功构建了p ET-30a-Irisin重组表达载体;SDS-PAGE电泳检测和Western blot结果表明,表达蛋白分子量约为14 k D,与预期大小一致;实现了人Irisin的可溶性表达,得到了较高纯度的目的蛋白,为进一步研究人Irisin蛋白的结构、功能及应用提供了理论依据。