人tumstatin基因的克隆表达及其鉴定

来源 :肿瘤防治研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户：guangmingkoxiuluo

【摘要】

：

目的重组表达人tumstatin，为人tumstatin的肿瘤受体显像奠定基础。方法提取HEK293细胞总RNA，通过RT-PCR扩增人tumstatin基因，导入pMD19-T，测序，然后亚克隆至pET28a，IPTG诱导表达，产

【作者】

：

颜廷东宋娜玲赵启仁刘家慧贺欣褚丽萍张春明

【机构】

：

中国医学科学院中国协和医科大学放射医学研究所

【出处】

：

肿瘤防治研究

【发表日期】

：

2007年11期

【关键词】

：

TUMSTATIN 肿瘤新生血管生成抑制因子基因克隆和表达 tumstatin Tumor angiogenesis inhibitor Gene clo

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目的重组表达人tumstatin，为人tumstatin的肿瘤受体显像奠定基础。方法提取HEK293细胞总RNA，通过RT-PCR扩增人tumstatin基因，导入pMD19-T，测序，然后亚克隆至pET28a，IPTG诱导表达，产物进行SDS-PAGE分析和Westernblot鉴定。结果提取的总RNA经电泳，有清晰的28S和18S两条带。RT-PCR扩增产物长度与理论值750bp相一致。测序证实tumstatin基因正确插入载体中。重组人tumstatin在大肠杆菌中高效表达，表达量约占菌体总蛋白量的

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