【摘 要】
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目的 构建PhoP和PhoR基因过表达结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv(以下简称H37Rv),检测不同电压条件下电转化构建的PhoP/PhoR基因过表达H37Rv菌株PhoP/PhoR基因的表达水平.
【机 构】
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石河子大学医学院病理生理学教研室,石河子大学“新疆地方与民族高发病”教育部重点实验室,新疆石河子832002;石河子市人民医院老年病一科,新疆石河子832000
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目的 构建PhoP和PhoR基因过表达结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv(以下简称H37Rv),检测不同电压条件下电转化构建的PhoP/PhoR基因过表达H37Rv菌株PhoP/PhoR基因的表达水平. 方法 提取并鉴定结核分枝杆菌重组穿梭质粒pMV361-PhoP和pMV361-PhoR,利用电转化技术将结核分枝杆菌重组穿梭质粒pMV361-PhoP和pMV361-PhoR导2H37Rv的感受态细胞中,构建PhoP/PhoR基因过表达H37Rv,应用实时荧光定量PCR检测不同电压条件下电转化构建的PhoP/PhoR基因过表达H37Rv的PhoP/PhoR基因表达水平. 结果 成功构建PhoP/PhoR基因过表达H37Rv.应用实时荧光定量PCR检测不同电压条件下电转化构建的PhoP/PhoR基因过表达H37Rv的PhoP/PhoR基因表达水平,其中在电压为2 300～2 500 V的范围内,电压越高,电转化菌的PhoP/PhoR基因表达量越高. 结论 成功构建了PhoP/PhoR基因过表达H37Rv菌株,以电压为2 500 V电转化构建的PhoP/PhoR基因过表达H37Rv的PhoP/PhoR基因表达量较高.
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