【摘 要】
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目的建立基于MALDI-TOF质谱技术的高通量检测乙型肝炎病毒耐药基因变异的临床检测方法。方法应用MassARRAY Assay Design软件设计乙肝病毒前C区/C启动子区(BPC)iPLEX引物,进
【机 构】
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兰州市第一人民医院检验科; 兰州市第一人民医院预防保健科;
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目的建立基于MALDI-TOF质谱技术的高通量检测乙型肝炎病毒耐药基因变异的临床检测方法。方法应用MassARRAY Assay Design软件设计乙肝病毒前C区/C启动子区(BPC)iPLEX引物,进行PCR反应、虾碱性磷酸酶(SAP)反应,单碱基延伸反应,树脂脱盐与质谱分析。采集31例拉米夫定反应与17例拉米夫定耐药乙肝患者血清标本进行分析,并对MALDI-TOF质谱所检测的HBV基因变异区域进行DNA毛细管电泳测序比对。结果建立了基于MAL-DI-TOF质谱技术的HBV基因突变检测平台,实现了临床血清标本的高通量检测。31例拉夫米定反应患者均无HBV变异,17例拉米夫定耐药血清标本中乙肝病毒前C区/C启动子区(BPC)均检测到变异。MASSARRY检测结果与DNA测序结果一致。结论 MALDI-TOF质谱技术灵敏度高、准确度高,可高通量、快速检测HBV基因变异。
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