【摘 要】
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目的建立一种能够简便、灵敏地检测原发性血小板增多症（ET）及原发性骨髓纤维化（PMF）患者外周血MPL515突变的方法，探讨我国ET和PMF患者的MPL515突变频率及JAK2V617F突变情况。方法选取2008至2010年复旦大学附属华山医院ET患者261例和PMF患者25例，提取患者外周血DNA。使用SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测标本的JAK2V617F突变。分别采用针对MPL51
【机 构】
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200040上海，复旦大学附属华山医院中心实验室,200040上海，复旦大学附属华山医院中心实验室,200040上海，复旦大学附属华山医院检验科,200040上海，复旦大学附属华山医院血液科,2000
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目的建立一种能够简便、灵敏地检测原发性血小板增多症（ET）及原发性骨髓纤维化（PMF）患者外周血MPL515突变的方法，探讨我国ET和PMF患者的MPL515突变频率及JAK2V617F突变情况。
方法选取2008至2010年复旦大学附属华山医院ET患者261例和PMF患者25例，提取患者外周血DNA。使用SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测标本的JAK2V617F突变。分别采用针对MPL515wt、MPLW515L和MPLW515K这3种基因型设计的Taqman探针，使用荧光定量PCR法检测MPL515突变，并通过T-A克隆挑取纯克隆测序确认。
结果在261例ET患者中，检测到JAK2V617F突变119例（45.6%），MPL515突变7例（2.7%），包括5例MPLW515L突变、1例MPLW515K突变和1例MPLW515L+K突变。25例PMF患者中，JAK2V617F突变为10例（40.0%），MPL515突变为3例（12.0%），包括1例MPLW515L突变和2例MPLW515L+K突变。1例MPLW515K突变的ET患者同时伴有JAK2V617F突变。
结论JAK2V617F是ET和PMF的分子标志物，而在JAK2V617F阴性的病例中，MPL515突变则是一个重要、有益的补充。（中华检验医学杂志，2012,35：634-638）
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