sBLyS突变体酵母表达载体的构建

来源 :重庆医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：kkkk8043

【摘要】

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目的构建人BLyS胞外区（soluble BLyS）突变体毕赤酵母分泌型表达载体，为深入探讨BLyS的功能和机制创造条件。方法以构建的人pUC19／sBLyS及其突变体重组质粒为模板，利用PCR扩增出6&#

【作者】

：

黄刚何凤田连继勤李蓉芬胡颖

【机构】

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第三军医大学生物化学与分子生物学教研室

【出处】

：

重庆医学

【发表日期】

：

2006年7期

【关键词】

：

B淋巴细胞刺激因子(BLyS) 毕赤酵母突变体 B lymphocyte stimulator（BLyS） Pichia pastories mutant

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目的构建人BLyS胞外区（soluble BLyS）突变体毕赤酵母分泌型表达载体，为深入探讨BLyS的功能和机制创造条件。方法以构建的人pUC19／sBLyS及其突变体重组质粒为模板，利用PCR扩增出6×his／sBLyS及其突变体的cDNA。克隆入酵母表达载体pPICgK；行序列测定后电转化入毕赤酵母GS115，并进行表型筛选和G418抗性筛选；对高拷贝整合的重组酵母表达菌株进行PCR鉴定。结果构建得到酵母融合重组表达载体pPIC9K／6×his／sBLyS及其突变体，经G418浓度

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