建立HPLC同时测定蝙蝠蛾拟青霉培养物中尿嘧啶、尿苷、鸟苷、腺嘌呤和腺苷5种核苷类成分含量的方法。采用Waters Sun Fire C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;以甲醇-水为流动相,梯度洗脱,柱温30℃,检测波长260 nm。结果尿嘧啶的线性范围为10.00~200.00 mg·L-1(r=0.999 4),尿苷的线性范围为10.10~202.00 mg·L-1(r=0.999 2),鸟苷的线性范围为10.00~200.00 mg·L-1(r=0.999 1),腺嘌呤的线性范围为10.30~206.00 mg·L-1(r=0.999 2),腺苷的线性范围为10.45~209.00 mg·L-1(r=0.999 1);尿嘧啶、尿苷、鸟苷、腺嘌呤和腺苷的精密度RSD分别为0.032%,0.035%,0.039%,0.049%,0.000 80%;尿嘧啶、尿苷、鸟苷、腺嘌呤和腺苷的平均加样回收率分别为97.34%,99.10%,101.6%,98.61%,100.2%,RSD分别为1.3%,2.1%,0.96%,0.95%,1.3%。该方法灵敏度高、选择性好,线性关系及重复性好,适合于蝙蝠蛾拟青霉培养物及其提取物中核苷类成分的含量分析。