【摘 要】
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目的 观察脾阴虚状态下肠黏膜屏障的改变及滋补脾阴方药的调控作用.方法 将SPF级雄性Wistar大鼠随机分为正常组(简称C组)6只和模型组(简称M组)14只.采用饮食不节与劳倦过度结
【机 构】
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南京中医药大学中医学院·中西医结合学院,中医脾藏象现代研究实验室 南京210023
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目的 观察脾阴虚状态下肠黏膜屏障的改变及滋补脾阴方药的调控作用.方法 将SPF级雄性Wistar大鼠随机分为正常组(简称C组)6只和模型组(简称M组)14只.采用饮食不节与劳倦过度结合耗伤阴液法建立脾阴虚大鼠模型.脾阴虚造模后将M组随机分为脾阴虚组(简称S组)和滋补脾阴方药组(简称Z组).每周收集粪便进行16S rRNA测序.采用qPCR技术检测空肠Claudin-1、Occludin、ZO-1 mRNA水平;Western Blot法检测空肠Claudin-1、Occludin、ZO-1蛋白表达;ELISA法检测肠道炎症因子水平.结果 在门水平上,S组较C组厚壁菌门比例增加(P＜0.05),拟杆菌门下降(P＜0.05),Z组较S组厚壁菌门减少(P＜0.01),拟杆菌门增加(P＜0.01);在属水平上,S组较C组乳杆菌属和Paraprevotella属比例升高(P＜0.05,P＜0.01),瘤胃球菌属和粘放线菌属下降(P＜0.01,P＜0.05);Z组比较于S组乳杆菌属比例明显减少(P＜0.0001),瘤胃球菌属和粘放线菌属增加(P＜0.05,P＜0.01),Paraprevotella属呈下降趋势(P＞0.05).与C组比较,S组空肠Claudin-1 mRNA和蛋白表达下降(P＜0.05,P＜0.01),Occludin mRNA和蛋白表达降低(P＜0.01),ZO-1 mRNA和蛋白表达呈降低趋势(P＞0.05);与S组比较,Z组Claudin-1 mRNA和蛋白水平升高(P＜0.01),Occludin mRNA和蛋白表达增加(P＜0.05),ZO-1 mRNA和蛋白水平呈上升趋势.S组空肠IFN-γ和IL-17含量较C组增加(P＜0.001),slgA、TGF-β、IL-4与IL-10水平下降(P＜0.01,P＜0.001);Z组较S组IFN-γ、IL-17含量减少(P＜0.001,P＜0.01),slgA、TGF-β、IL-4与IL-10含量升高(P＜0.01,P＜0.001).结论 滋补脾阴方药能够调节肠道菌群中厚壁菌门、拟杆菌门、瘤胃球菌属、乳酸杆菌属与粘放线菌属比例,增加Claudin-1、Occludin mRNA和蛋白表达,并调节Th1/Th2、Th 17/Treg细胞分泌的细胞因子水平,改善脾阴虚大鼠肠黏膜生物屏障、机械屏障及免疫屏障的异常变化.
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