【摘 要】
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目的探讨miRNA-135b在多种乳腺癌细胞系中表达及靶向APC基因对三阴型乳腺癌细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响。方法通过实时荧光定量(RT)-聚合酶链反应(PCR)检测miRNA-135b在正常乳腺细胞系Hs578Bst及乳腺癌细胞系Hs578T、MCF7、HCC1937、MDA-MB-231、MDA-MB-453、BT-549和MDA-MB-468中的表达,选取其中两种高表达miRNA-135
【机 构】
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266071 青岛大学医学院,青岛大学医学院附属医院乳腺外科,青岛大学医学院附属医院乳腺外科,青岛大学医学院附属医院乳腺外科,青岛大学医学院附属医院乳腺外科,青岛大学医学院附属医院乳腺外科,
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目的探讨miRNA-135b在多种乳腺癌细胞系中表达及靶向APC基因对三阴型乳腺癌细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响。
方法通过实时荧光定量(RT)-聚合酶链反应(PCR)检测miRNA-135b在正常乳腺细胞系Hs578Bst及乳腺癌细胞系Hs578T、MCF7、HCC1937、MDA-MB-231、MDA-MB-453、BT-549和MDA-MB-468中的表达,选取其中两种高表达miRNA-135b的MDA-MB-231、MDA-MB-468为对象,根据处理方法,实验分3组:空白组(自然生长细胞)、阴性对照组(转染阴性对照试剂)、实验组(转染miRNA-135b抑制剂)。采用RT-PCR及Western印迹检测APC基因的表达;Cell Counting Kit-8 (CCK-8)实验、Transwell体外侵袭实验检测乳腺癌细胞增殖、侵袭及迁移能力。
结果miRNA-135b在三阴型乳腺癌细胞系中的表达量均高,其中在MDA-MB-231细胞中阴性对照组和实验组分别0.97±0.13、0.42±0.03;MDA-MB-468细胞转染miRNA-135b抑制剂后,1.02±0.03、0.47±0.04;实验组中miRNA-135b的表达受到显著抑制,差异有统计学意义。实验组APC基因mRNA及其蛋白的表达显著上调,MDA-MB-231中阴性对照组和实验组分别为1.01±0.11、1.75±0.13 (P=0.013, P=0.021),MDA-MB-468中(P=0.017, P=0.014);实验组细胞增殖活性明显受到抑制MDA-MB-231中(P=0.00),MDA-MB-468中(P=0.01);侵袭及迁移能力明显降低MDA-MB-231中(P=0.002, P=0.00),MDA-MB-468中(P=0.01, P=0.00)。
结论miRNA-135b在多种三阴型乳腺癌细胞中呈高表达,可靶向抑制APC基因,促进三阴型乳腺癌细胞系MDA-MB-231及MDA-MB-468的增殖、侵袭及迁移。
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