【摘 要】
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目的：构建人CD81-LEL基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达。方法：通过PCR扩增得到CD81-LEL基因编码区片段,与pMD18-T载体连接,经序列测定后,再将该扩增片段亚克隆入原核
【机 构】
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第四军医大学基础部微生物学教研室,第四军医大学药学系
【基金项目】
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国家自然科学基金青年基金资助项目(批准号:30600021)
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目的：构建人CD81-LEL基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达。方法：通过PCR扩增得到CD81-LEL基因编码区片段,与pMD18-T载体连接,经序列测定后,再将该扩增片段亚克隆入原核表达载体pET32a（＋）中。酶切鉴定正确的表达载体pET32a-CD81-LEL转化表达菌BL21（DE3）进行诱导表达,用SDS-PAGE和Western-blot对表达产物进行鉴定,用镍离子亲和层析法纯化融合蛋白。结果：成功构建了原核表达载体pET32a-CD81-LEL;SDS-PAGE显示目的蛋白大量表达
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