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本文采用Trizol试剂提取毒害艾美耳球虫第二代裂殖子总RNA,用oliogo（d T）磁珠法纯化m RNA后,采用SMART技术构建了毒害艾美耳球虫第二代裂殖子cDNA噬菌体表达文库。经鉴定,原始文库容量为2.14×106pfu/m L,扩增后的文库容量为4.47×1010pfu/m L,扩增文库的重组率为90%。随机挑取100个单克隆,通过菌液PCR检测得知文库插入片段长度以400～1000 bp为主。本研究结果为毒害艾美耳球虫新基因的筛选和功能研究奠定了基础。